一种用家蚕杆状病毒Bac-to-Bac系统表达EGF—TCSKDEL融合蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种用家蚕杆状病毒Bac-to-Bac系统表达EGF—TCSKDEL融合蛋白的方法，将EGF—TCSKDEL基因亚克隆至Bac-to-Bac系统的供体质粒pFastBacHTb的多克隆位点中，转化入含有家蚕杆状病毒Bacmid基因组的感受态细菌DH10BmBac细胞内，通过蓝白斑筛选获得阳性克隆，随后从阳性克隆中抽提质粒DNA，用抽提的质粒DNA转染家蚕细胞BmN，获得含有EGF—TCSKDEL基因的重组杆状病毒，用收集到的重组杆状病毒大量感染BmN细胞，获得大量表达EGF—TCSKDEL融合蛋白；本发明具有较高的表达量和生物活性，为创造新的高活性、高抑瘤率、低免疫原性、小分子量的靶向性抗肿瘤药物奠定了基础。