用于减轻技术领域中所不希望的医学状况的有效要素

摘要

一种用于治疗或预防炎症相关状况的组合物，该组合物包括作为一种有效要素（=AP）的一个载体，该载体展示出清除剂结构的一种多重性，该清除剂结构能够减轻炎症相关状况的中介物的活性。该清除剂结构包括符合化学式X1(-R"-)(-R')mHn（化学式I）的一个亲核中心，其中：a)X1是一个单键合的杂原子，该杂原子是在N、O以及S之中选择的，并且展示出一个自由电子对，b)m是0或1并且n是1或2，c)-R’’-是一个提供经由其自由价之一的向该载体的附接以及在其另一个自由价的向X1的附接的二价有机基团，以及d)R'-是一个经由其自由价被附接至X1上的单价有机基团。一种用于治疗或预防一个正在遭受或有遭受这样的状况的风险的个体的炎症相关状况的方法。该方法包括以下步骤：i)提供包含AP的本发明的组合物，以及ii)使AP与a)在所述个体中的、或b)从所述个体中分离的所述中介物进行接触。

说明书

技术领域

本发明涉及用于对抗个体的炎症级联的中介物的方法和组合物。该方 法主要旨在治疗和/或预防个体内炎症相关状况（例如炎症相关反应、作用 以及响应），和/或减弱的氧化应激。

背景技术

脂质过氧化产物是炎症级联中的早期阶段和主要中介物。这些产物包 括内源的和/或外源的醛类，例如4-羟基-壬烯醛、丙二醛和丙烯醛，并且 通过蛋白的稳定修饰来起作用，这随后在加合物形成时改变它们的稳定性 和官能度。已经证明若干疾病与醛类加合物的形成相关联或是由增强的醛 类加合物的形成导致，包括神经退行性疾病（阿尔茨海默症、帕金森病） 、动脉硬化、骨关节炎、白内障等。

醛和酮基基团是反应性亲电子试剂。它们与亲核体（优先是包含具有 一个自由电子对的氮的亲核体）反应，以形成席夫碱或亚胺衍生物。后续 重排（例如阿马多里类型（Amadori type）的后续重排）可以产生一种对 与仍另一个亲核体反应敏感的新的醛和酮基基团。这形成了蛋白交联和后 续变性的基础。

另一个体内的醛修饰是氨基（例如蛋白中）与具有一个还原端的碳水 化合物的反应，该还原端带有一个掩蔽的醛官能度。这种非酶的糖化作用 产生了蛋白的“高级糖基化终产物”（也称为AGE修饰），这潜在地会 导致炎症。这些反应涉及美拉德反应。

若干分子（包括肌肽肼苯哒嗪等）在体外通过将醛捕获为亚胺或席夫 碱展示出醛清除特性，但是这些作用应用于体内以及临床环境中时是可疑 的或不足的。对于有限的醛清除剂作用的最重要的理由是这些分子的小尺 寸，这些小尺寸给了它们一个不利的药物代谢动力学特征曲线。

人们认为发明的组合物的有效要素能够减轻早期阶段中介物由于其反 应性基团的含量而可以具有的对炎症相关响应的作用，这些反应性基团能 够形成与一个亲电子的羰基和/或亲电子的碳-碳多重键的共价结合。具体 认为羰基是一种可能与一个碳-碳多重键（α,β-不饱和的）共轭的醛基。我 们的结果提示，发现的有利作用需要经由表明的反应基团在我们的有效要 素与早期阶段中介物之间的共价结合的实际形成。然而，由于这还没有被 最终证实，所以本发明暂时（在这个说明书提交时）不与这样的一种机理 联系。仍可以存在对我们用我们的有效要素已经实现的有利的并且令人惊 讶的作用的其他解释，我们的有效要素包含选择的载体结合的反应性亲核 基团。

本发明涉及引起炎症相关响应的中介物的两个主要种类：

a)内源中介物形成于它们发挥其作用的个体体内。这个组包括作为 一个小组的中介物/物质，它们是导致炎症的响应的部分；以及作为一个第 二小组的中介物/物质，它们能够导致所不希望的作用，这些所不希望的作 用可以被认为是炎症相关响应的部分但是作为炎症是非必需的，例如不适 、头痛、宿醉、白内障等，以及

b)外源中介物形成于它们发挥其作用的个体体外。它们能够在体内 导致炎症相关作用，和/或在这样的一种作用可以被实现前在体内必须被转 化为一种内源中介物。

在本发明的背景下，如果没有另行说明，炎症相关状况（连同炎症相 关反应和作用）将涵盖在前面段落中讨论的炎症连同所不希望的状况。

关于包含中介物和/或者这样的中介物的清除的说明性的科学文章和 专利文件是：

1.Burcham（伯查姆）等人，WO2003055487Method of controlling  damages mediated byα,β-unsaturated aldehydes（控制由α,β-不饱和醛介导的 损害的方法）。

2.Burcham（伯查姆）等人，WO2006002473Method of controlling  damages mediated byα,β-unsaturated aldehydes（控制由α,β-不饱和醛介导的 损害的方法）。

3.Cho（朝）等人，WO2009091992Repairing damaged nervous system  tissue with nanoparticles（用纳米颗粒修复损害神经系统组织）。

4.Guitto（奎图）等人，Synthesis and evaluation of  neuroprotective,β-unsaturated aldehyde scavenger histidyl-containing  analogues of carnosine（神经保护的、β-不饱和的醛清除剂包含组氨酰基的 肌肽类似物的合成和评估）.J.Med.Chem（《药物化学杂志》）.48(2005) 6156-6161。

5.Guitto（奎图）等人，Malondialdehyde scavenging and aldose-derived  Schiffs bases'transglycosylation properties of synthetic histidyl-hydrazide  carnosine analogs（合成组氨酰基-酰肼肌肽类似物的丙二醛清除和醛醣衍生 席夫碱的转糖基作用特性）.Bioorg.Med.Chem（《生物有机与药物化学 快报》）.15(2007)6158-6163。

6.Hamann（哈曼）等人，Hydralazine inhibits compression and  acrolein-mediated injuries in ex vivo spinal cord（肼苯哒嗪抑制离体脊髓中的 压迫和丙烯醛介导的损伤）.J.Neurolog（《神经学杂志》）104(2008)708-718

7.Hamann（哈曼）等人，Acrolein scavenging:a potential novel  mechanism of attenuating oxidative stress following spinal cord injury（丙烯醛 清除：减弱脊髓损伤后的氧化应激的一种潜在的新机制）.J.Neurochem （《神经化学杂志》）111(2009)1348-1356。

8.Ito（伊藤）等人，Anti-inflammatory function of an in situ  cross-linkable conjugate hydrogel of hyaluronic acid and dexamethasone（透明 质酸和地塞米松的原位可交联共轭水溶胶的抗炎症功能）.Biomaterials （《生物材料学》）28(2007)178-1786。

9.Monnier（莫尼尔）等人，Wake up and smell the Maillard reaction （唤醒并且轻嗅美拉德反应）.Sci.Aging Knowl.Environ.50(2002)pe21

10.Negre-Salvayre（内格雷-萨尔瓦伊尔）等人，"Review:Advanced lipid  peroxidation end products in oxidative damage to proteins（“综述：高级脂质 过氧化终产物对蛋白的氧化性损伤）.Potential role in diseases and  therapeutic prospects for the inhibitors（在疾病中的潜在作用以及对抑制剂的 治疗前景）.Br.J.Pharmacol（《英国药物学杂志》）.153(2008)6-20

11.Reddy（雷迪）等人，Carnosine:a versatile antioxidant and  antiglycating agent（肌肽：一种多用途抗氧化剂和抗糖化试剂）.Sci（《科 学》）.Aging Knowl（《衰老知识》）.Environ（《环境学》）.18(2005) pel2

展示出共价地附接的醛反应性官能度或醛基的聚合物的合成和用途已 经描述于（IPR-S系统AB）WO2009108100以及其中所引用的参考文件 中。该出版物表明，通过在体内这两种不同地官能化聚合物相互间的反应 形成的水溶胶可以是导致低的或没有宿主保护反应（包括低的或没有炎 症）的高度生物相容的。关于这的理由仍未总结出任何结论。

目的

本发明的根本目标是至少部分地改善用于抑制上述类型的中介物的更 早提议的低分子量物质的作用，即改善这些中介物的炎症相关作用的治疗 和/或预防。为了达到一个较高的和/或延长的作用，这些改善可以与以下 相关

a)治疗和/或预防炎症和/或其他炎症相关状况时的治疗作用，

b)减轻内源的和/或外源的炎症相关中介物的所不希望的作用的试 剂的用途的多功能性，

c)有效要素的药物代谢动力学等。

发明

本发明的诸位发明人已经认识到，相关清除剂官能度向一个大分子载 体的固定将改善相对应的低分子量清除剂分子的作用。出人意料地，已经 发现这些最佳的官能度已经被发现于正常用于交联大分子载体和/或用于 载体结合的治疗活性实体的合成的反应性基团之中（WO2009108100以及 其中所引用的参考文件）。

在本说明书中，我们的原理被能够清除醛的官能化载体的合成证明。 在实验部分，示出了在体外，这个种类的构建体用来抑制人血白蛋白以一 种剂量依赖性的方式被丙烯醛氧化（实例1）。另外，使用一种伤口愈合 模型，在啮齿类和人类二者中都证明了对炎症的体内作用（实例2和3） 。还证明了降低烟草烟雾中的炎症相关中介物的作用（实例4）。

第一主要方面（组合物）

该第一方面是用于治疗或预防一个正在遭受或有遭受这样的状况的风 险的个体的炎症相关状况的一种组合物。主要典型特征是该组合物包括作 为一种有效要素（=AP）的展示出清除剂结构（scavenger structure）的多 重性的载体，当存在于该载体上时，该结构能够减轻和/或中和炎症相关状 况的中介物的活性。

第二主要方面（方法）

本发明的该第二方面是用于治疗或预防一个正在遭受或有遭受这样的 状况的风险的个体的炎症相关状况的一种方法。该方法的主要典型特征包 括以下步骤：

i)提供一种组合物，该组合物包含作为一种有效要素（=AP）的展 示出清除剂结构的多重性的载体，该结构能够减轻和/或中和炎症相关状况 的中介物的活性，并且

ii)使AP与a)在所述个体中的、或b)从所述个体中分离的所述中 介物进行接触。

替代方案(a)意味着向所述个体给予这一包含AP的组合物。

该个体典型地是一种动物，例如一种脊椎动物，特别强调的是一种哺 乳动物，例如人。在这种情况下，该方法是一种治疗疗法，该个体典型地 是一个患者。

该中介物可以是水溶性的或水不溶性的。该中介物典型地是与参与炎 症相关状况的早期阶段的中介物（=早期阶段中介物）相同种类的中介物， 并且本身典型地具有一个低分子量，例如≤3000道尔顿或≤2000道尔顿 或≤1000道尔顿或≤500道尔顿。这并不排除存在分子量≥3000的、例 如展示出生物聚合结构（例如蛋白/多肽结构和/或碳水化合物结构和/或核 酸结构）的中介物。

步骤(ii)意味着由中介物导致的炎症相关作用是通过该中介物的中 和而减轻的。

步骤(ii.a)意味着该中介物的接触和中和发生于体内，即在正在遭受 或有遭受炎症相关状况（涉及该中介物）的风险的该个体的身体内，在其 皮肤上等

步骤(ii.b)涵盖两种主要情形：

A)该中介物存在于起源于个体的流体、组织、器官等。在中和该中 介物后，将流体、组织、器官等递送至正在遭受或有遭受炎症相关状况的 风险的个体，即该中介物的作用的接触以及中和离体地和/或体外地发生。 该中介物主要是内源的，但也可以是外源的。接受处理的流体、组织、器 官等的个体可以是该流体、组织、器官等来源的该个体，或是一些其他的 个体。

B)该中介物存在于一种流体中，该流体不起源于一个个体，例如环 境大气、有待吸入的气体、水等，并且典型地具有一个非生物起源。在中 和该中介物后，允许该流体与正在遭受或有遭受炎症相关状况的风险的个 体接触，即该中介物的作用的接触以及中和发生于体外，并且在正在遭受 或有遭受炎症相关状况的风险的个体的外部。该中介物典型地是外源的并 且该中和发生于将该中介物与正在遭受或有遭受炎症相关状况的风险的 个体进行接触之前。在该中介物中和后，用于使该流体与该个体进行接触 的典型途径包括吸入、口腔的、皮肤的等。

组合物

该组合物可以包含一种或多种配制品，其中它们中的至少一种包括AP 或对于AP的体内形成必需的试剂（例如，如在WO2009108100中对用于 胞外基质的体内形成的组合物所描述的）。

有效要素（=AP）

AP包括一种展示出该清除剂结构的多重性的载体。每个清除剂结构都 坚固地附接至该载体，例如共价地。AP连同该载体本身可以在水性液体 中可溶或不可溶，这些水性液体例如是水、体液（例如血液、血清、血浆 、尿、淋巴液、泪液、肠液、胃液、唾液、滑液等）。

AP可以被固定于一种水不溶性支持物上，取决于预期的用途，该支持 物可以具有不同的物理和/或几何外观。进一步参见下面。

该载体和该支持物之一或两者在以下意义应该是惰性的：它们不应该 作为竞争反应物参与该清除剂结构和该中介物之间的反应。它们两者都应 该具有导致低的或没有宿主保护反应（包括低的或没有炎症）的可接受的 生物相容性。

清除剂结构

当存在于该载体上时，该清除剂结构减轻和/或中和该中介物的活性。 这一减轻/中和可以是不可逆的或可逆的，优选前者。它可以通过将该中介 物捕捉到该载体或通过将该中介物留于（=将该中介物转化为）一种未结 合到该载体的灭活形式来发生。当捕捉即将发生时，这些清除剂结构和位 于该中介物上的反应性基团典型地相互反应，导致将该中介物以一种被转 化的和被中和的形式附接至该载体的共价键合的形成（=加合物形成）。

该清除剂结构包括一个第一亲核中心，该第一亲核中心优选地能够参 与和醛基的羰基（C=O）、和/或与C,C-多重键的加成反应，优选地一个或 多个拉电子取代基直接附接至该C,C-多重键。发生于体内的并且提示参与 在所不希望的炎症相关作用中的这个种类的反应性类别是例如丙二醛、糖 醛、α,β-不饱和醛-CH=CH-CH=O，例如丙烯醛、4-羟基-壬-2-烯醛等（早 期阶段炎症相关中介物的实例）。

该清除剂结构的亲核中心（第一中心）优选包括一个单键合的第一杂 原子N、O或S（=X¹），它们展示出

a)一个自由电子对，

b)一个或两个氢，以及

c)直接结合至该杂原子的一个或两个有机基团R'-(单价的)和-R"-(二 价的)。

这些优选的杂原子是N和S。S优选地与如上所讨论的相同的清除剂 结构中一个第二亲核中心（例如伯氨基或仲氨基）的存在相结合。该二价 有机基团-R"-提供了经由其自由价与该载体的结合。-R"-的另一个自由价连 同另一个有机基团R'-的自由价被直接附接至杂原子X¹上。

一般地，一个亲核中心具有以下化学式：

X¹(-R’’-(-R’)_mH_n)（化学式I）

其中X¹、R'-和-R"-是如在前面段落中所定义的，并且m是0或1并且 n是1或2，其中对于X¹=N，m加n的和是2，而对于X¹=S和O，m 加n的和是1。

一个单键合的原子意味着该原子只通过单键被直接地结合至其他原子 上。一个多键合的原子意味着该原子通过一个三键或双键被直接地结合至 另一个原子上。提及的这些原子主要是N、O、S以及碳。

当与该中介物相互作用时，这些优选的亲核中心典型地是不带电的。 对于为一个酸碱对的不带电的碱式或酸式的亲核中心，≥5%，例如≥25% 或≥50或≥75%的总浓度的酸碱对应处于不带电的形式。

当杂原子X¹是N时，与醛基反应的能力将包括形成的加合物能够经 历自发的消除水（H₂O）以形成亚胺结构（-CH=NR"-，m=0并且n=2） 和/或烯胺结构（-CH=CHNHR"-，m=0并且n=2）或-CH=CHNR'R"-，m =1并且n=1），两个替代方案都需要醛基-CHO）的sp³-杂化的α-碳上的 氢（α-氢）。当杂原子X¹是S或O、m=0并且n=1时，这意味着在H₂O 的消除时获得的结构是硫烯醇化物或烯醇化物（-CH=CHX¹R'）（其条件 是存在醛基-CHO的α-氢）。这些消除反应典型地意味着一个更加稳定的 产物和/或可以进一步反应成一个另外的稳定化的“终”产物的产物的形成 。包含允许以稳定化的终产物告终的后续反应的基团的清除剂结构的选择 将支持初始的加成反应的不可逆性，并且通常是优选的。

第一亲核中心与中介物上的反应性C,C-多重键的反应将导致一种初级 加合物，该初级加合物包括结构>CH-CHX¹-（对于C,C-双键），并且如果 该多重键对醛基是α,β位，那么可以形成不同的互变异构加合物。例如 –CHX¹-CH=CHOH（烯醇）和–CHX¹-CH₂-CH=O（酮基），它们能够使相 同的或另一个清除剂结构的另一个亲核中心与该中介物分子反应，该反应 以稳定化的终产物告终。

有机基团R'-和-R"-中的一个或两个都包括以下化学式的结构

-CH₂(X⁴)_O’(C=X³)_n'(X²)_m’-      （化学式II）

其中

a)m'、n'和o'中的每个都是0或1，优选m'是1，进一步优选n'和o' 中的一个或两个也都是1，

b)X²、X³、以及X⁴中的每个都是在NH和一个杂原子S或O之中 选择的，优选X²和X⁴中的一个或两个是在NH和O之中选择的，进一步 优选X³是在NH、O和S之中选择的，

c)左边自由价提供了经由至少一个二价亚烷基-R**-至一个单价烷 基R*-或至该载体的结合，它们中的每个都包括化学式II所示的亚甲基 -CH₂-，

d)右边自由价直接结合至第一杂原子X¹上。

子结构C=X³（=B）还包括其他的形成酯和酰胺的子结构，这些子结 构衍生自酸官能团并且当X²和/或X⁴是氧时形成酯官能团，和/或当X²和/ 或X⁴是NH时形成酰胺官能团，例如磺酰胺（B是S(=O)₂）或磷酰胺（B 是P=O(NH₂)或P=O(OH)，n'=1）。

单价烷基R*-和二价亚烷基-R**-中的一个或两个可以是直链的、支链 的或环的，并且可能包含一种或多种在醚（-O-，-S-）、羟基（-OH）、巯 基（-SH）和氨基（-NH-，-NH₂）之中选择的结构。每个自由价表示至sp³- 杂化碳（=烷基碳）的结合。这些烷基中的一个或两个都优选地是一种低 级烷基，在此背景下，这意味着它们包括一个、两个、三个、四个、五个 直到十个sp³-杂化碳，典型地带有至多一个结合至该碳的杂原子O、N以 及S。这些基团典型地在以下意义是惰性的：它们不参与中和该中介物的 反应。化学式(I)中给出的这些氢和/或其子结构可以用在如对于R*-所讨 论的相同的烷基之中选择的一种烷基替代。

优选的是将该第一亲核中心附接至该载体的二价基团-R’’-包括一个符 合化学式I和/或II的子结构。

在前面段落中所讨论的结构元素（子结构）将支持电子的离域并且因 此进一步支持初始的加成反应的不可逆性。

优选的清除剂结构因此具有一个包含第一杂原子X¹连同符合化学式II 的结构的亲核中心，并且是在以下之中选择的：

a)氨基，优选是伯氨基或仲氨基

b)酰肼基团，例如，比如作为-CONHNH₂基团的部分的-NH-NH₂； 氨基脲基团，例如-NHCONHNH₂；肼基甲酸酯基团，例如-OCONHNH₂； 氨基硫脲基团，例如-NHCSNHNH₂；硫肼基甲酸酯基团，例如-OCSNHNH₂（当经历与醛基的加成/消除反应时，腙、缩氨基脲、硫卡巴腙键联/基团 等的形成）

c)氨氧基，例如-ONH₂等（当经历与醛基的加成/消除反应时，形成 肟键联/基团等），

d)硫醇基，例如-SH(当该硫醇基与C,C-双键反应时，形成迈克尔加 成产物。当该双键对酮或醛羰基是α,β位时，该产物可以经历酮基-烯醇互 变异构化，参见上面）。

在前面段落中给出的这些基团中的每一个中所表明的自由价优选地经 由一个包括上述二价亚烷基-R**-的连接物结构将该亲核中心附接至该载 体。只要它们不实质上抵消该亲核中心的未取代形式的所希望的反应性， 直接结合至氮的氢可以用单价烷基替代，该单价烷基是在和R*-相同的烷 基之中选择的。因此，例如在硫醇基和在羟基中的氢是不能被替代的。两 个替代的烷基连同它们附接至其上的原子可以一起形成一个环状结构，即 形成一个例如在对-R**-基团的替代物之中选择的二价亚烷基。

上面所讨论的二价结构-R**-和-R’’-在紧靠该载体处包括一个连接物 结构，该连接物结构不负面地影响该清除剂结构的亲核中心的所希望的作 用。此类结构不是本发明的部分并且适合的此类结构可以被本领域的一般 技术人员所设计。

在某些优选的清除剂结构中可以存在一个第二亲核中心，该第二亲核 中心a)可以是有机基团（例如R*-或-R**-基团）之一的部分，并且b)以 如对于第一亲核中心的相同的方式包含一个第一杂原子N、O或S（=Y¹） 。原则上，这意味着这个第二亲核中心符合以下化学式：

Y¹(-R"-)(-R')_mH_n  （化学式III）

以及化学式

-CH₂(Y⁴)_O’’C=Y³)_n’’Y²)_m’’-  （化学式IV）

其中m、n、m"、n"、o"、Y¹、Y²、Y³、Y⁴、-R"-以及-R'是与化学式I 和II的m、n、m'、n'、o'、X¹、X²、X³、X⁴、-R"-以及-R'的变量的相同的 组中选择的。这包括：氢（H）可以如对于化学式I和II所建议的被替代 。

杂原子Y¹优选地是以下的部分

a)其中自由价优选地可以结合至sp³-杂化碳的-NH₂基团，或

b)其中自由价优选地可以结合至sp³-杂化碳的硫醇基-SH。在(a)和 (b)两者中，化学式IV中的m"、n"和o"中的每一个都是0。

第一杂原子Y¹与第一杂原子X¹之间的距离典型地大于两个或三个原 子，上限是例如20个原子，优选是这两个杂原子之间的4、5或6个原子 。该距离应该支持分子内的环化作用，典型地经由一个或多个加成反应。 这个环化作用典型地包括第二亲核中心与以下之间的加成反应

a)如上所述的通过第一亲核中心与起始醛基的反应形成的碳-碳或 碳-杂原子双键，和/或

b)已经存在于起始醛中的反应性多重C,C-键，例如，比如对于该醛 基是α,β位的反应性双C,C-键，和/或

c)一个第二酮基或醛羰基，其条件是这样的一个基团存在于该中介 物分子中。

环化作用的结果是一个包含第一杂原子Υ¹和第一杂原子X¹的n-元的 环结构，其中在n-元中的n是≥3的整数，优选是5或6。只要容许这样 的功能基团的空间考量和相对位置，也可以形成更大的环，例如7-、8-、 9-、10-、11-、12-、13-、14-元环。该环化作用之后可以在产生一个或多 个碳-杂原子双键、环开口等的重排反应（例如分子内地），和/或消除反 应后。

载体

适合的载体的选择取决于具体用途的需要。典型的载体是在大分子化 合物之中选择的，即是一个具有≥2000道尔顿、优选≥10000道尔顿或≥ 50000道尔顿的分子量的化合物，并且优选地展示出一种聚合结构，即是 一种可以是均聚物、共聚物或具有不同的聚合结构的两个或多个聚合物之 间的化学加合物的聚合物。其他适合的载体可以具有≤2000道尔顿的分 子量并且展示出被下面所讨论的低数量的单体单元（例如≥20并且≤ 100）的可能性而表明的聚合结构。在此背景下，术语“加合物聚合物” 表示通过两个展示出相互反应性基团的聚合物的反应形成的一种产物，这 些相互反应性基团能够形成共价键，这些共价键在这两个相互反应性基团 相互反应时将这两个聚合物连接在一起。例如参见WO2009108100（IPR- 系统AB）以及其中所引用的参考文件。适合的大分子载体因此可以在合 成聚合物（=人工聚合物）、生物聚合物（天然聚合物，例如多糖、多肽 、蛋白等）以及生物合成聚合物之中选择，其中“生物合成聚合物”是指 展示出合成聚合结构和生物聚合结构两者的一种大分子载体或化合物。载 体聚合物可以是交联的或非交联的。相对于支化，该聚合物可以是无支链 的（即线性的）、或支链的（包括超支链的亦或树枝状的）。支化度因此 可以在0与1之间变化，例如是≥0.10、或≥0.25、≥0.5、≥0.75或≥0.90 和/或≤0.90、或≤0.75、或≤0.50、或≤0.25或≤0.10。交联聚合物通 常在水性液体中是不溶的，然而非交联聚合物的溶解度取决于该聚合物的 总体结构，例如极性的和/或亲水的基团的存在和数量。载体聚合物还可以 被衍生成包含非聚合的或聚合的基团，例如交联、取代基、带电或不带电 基团、清除剂结构（如上所讨论的）等。在水性液体中不溶的大分子载体 可以具有如对于在本说明书的其他地方的支持物材料所讨论的不同的物 理和几何形状。

上面的术语聚合物包括有机的连同无机的聚合物。

在载体中使用的大分子或聚合物可以是水不溶的并且在水性液体介质 中是可悬浮的（当以颗粒形式时）。

适合作为载体材料的聚合物和其他大分子可以是亲水的或疏水的，优 选是亲水的。显著疏水的大分子载体在水性液体中通常是不溶的，这意味 着可能存在与它们的宿主保护反应的风险，并且还意味着对与炎症相关中 介物反应的亲核中心的可获得性可能不是最佳的。为了克服这类问题，通 常优选的是在它们的表面引入亲水基团（亲水化）。除了别的之外，亲水 基团的引入可以通过以下完成

a)用一种亲水材料涂覆，

b)选择在大分子化合物的合成过程中展示出亲水基团以及适当的条 件的建筑模块/单体，以及

c)用亲水基团化学衍生化，随后是碱性疏水聚合物的合成，等。

一个基团、结构或载体分子的亲水性通常随着比例r=杂原子O、N 和S的数目的总和除以碳原子数目的总和的增加而增加。亲水基团/化合物 典型地具有r≥0.5、优选是≥1.0，并且对于疏水基团具有r≤1.0、优选是 ≤0.5。典型的亲水基团是羟基、氨基、酰胺基、羧基（包括游离酸羧基以 及羧化物（酯和盐）等。典型的疏水基团是烷基（C_nH(2_n+1)-、C_nH_(2n-1)-、 C_nH_(2n-3)-等）、苯基（包括烷基苯基）、苄基（包括其他苯基烷基）等。

一个载体大分子典型地包括如下聚合物骨架，该聚合物骨架包括≥5 个、或更优选地是≥10个（例如≥25个）不同和/或相同的被连接在一起 的单体单元。该聚合物可以携带具有不同长度和种类的突出的或悬垂的聚 合的和/或非聚合的基团。载体聚合物优选地是亲水的，带有在这个说明书 的其他地方所给出的那些之中选择的亲水基团。最优选的亲水基团是羟 基，这些优选载体聚合物和/或其他大分子载体是由展示出≥5个、优选是 ≥10个（例如≥25个或≥50个）羟基和/或≥5个单体亚单元（它们中的 每个都展示出每单位一个、两个、三个、四个或多个羟基）的聚羟基聚合 物（PHP或PH-聚合物）选择的。

可以存在于聚合载体中的典型的聚合物是a)聚酯聚合物，b)聚酰胺 聚合物，c)聚醚聚合物，d)聚乙烯聚合物，e)多糖等。载体可以包括这 些聚合物/聚合结构中的一个或多个。

聚酯聚合物具体是通过以下的聚合反应而获得的a)展示出至少一个 羟基和至少一个羧基的单体，或b)包含展示出两个或多个羟基的单体以 及展示出两个或多个羧基的单体的混合物。

聚酰胺聚合物具体是通过以下的聚合反应而获得的a)展示出至少一 个氨基和至少一个羧基的单体，或b)包含展示出两个或多个氨基的单体 以及展示出两个或多个羧基的单体的混合物。

聚酰胺的一个重要的组是展示出多肽结构连同多个羟基的那些（PH- 聚合物）。这类适合的聚酰胺聚合物典型地是基于羟基-羧酸、氨基-羧酸 作为单体的，特别是带有对于该羧基基团位于α位的氨基，例如丝氨酸、 苏氨酸、酪氨酸、脯氨酸等。

聚醚聚合物典型地是与其他聚合结构（例如上面的(a)、(b)、(d)和/ 或(e)的聚合物）组合使用的，这些其他聚合结构相对于基团（例如羟基 、氨基等）的存在是多官能的。典型的聚醚聚合物是聚氧化乙烯以及氧化 乙烯与其他低级氧化烯、低级表卤代醇等之间的不同共聚合物。

在本发明中可以适合作为聚合载体的聚乙烯聚合物典型地被发现于包 含一个、两个或多个不同单体单元的聚合物之中，这些单体单元是在羟烷 基丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯、N-羟烷基丙烯酰基-和N-羟烷基甲基丙烯酰 胺、羟烷基乙烯醚、乙烯酯等之中选择的。聚乙烯醇典型地是通过聚乙烯 酯的部分水解获得的，这意味着在本发明中优选的聚乙烯醇典型地展示出 酯基的残差量（≤10%或≤5%）。

可以存在于用于本发明的载体中的典型的多糖包括葡聚糖、淀粉、琼 脂糖、agaropectin、纤维素、葡糖胺葡聚糖（GAG），以及这些多糖的衍 生物等。最有意义的多糖是葡聚糖、某些葡糖胺葡聚糖（GAG）（例如透 明质酸）等。

有待在该载体中使用的聚合物在其合成之后已经被衍生化（例如交联 化）和/或功能化。

包括第一、可任选的第二亲核中心的清除剂结构以及对于这些清除剂 结构所讨论的不同杂原子典型地是附接至该大分子载体上的该有机基团/ 取代基的部分。在某些变体中，清除剂结构的不同部分可以是附接至该载 体上的不同基团/取代基的部分和/或是该载体的部分。

除了别的之外，适合的载体聚合物的尺寸/分子量取决于本发明的组合 物/方法的实际应用/用途。因此，相对于具体的聚合结构和/或尺寸，这些 适合的载体聚合物可以在一个宽的区间内变化。因此，存在于该载体中的 聚合物的单体亚单元的数目（平均值）通常可以是≥20或≥100或≥200 或≥300或≥500或≥1000或≥2000或≥20000或≥50000和/或≤50 000或≤20000或≤2000或≤1000或≤500或≤300或≤200,或≤100 （其条件是当这些值被组合以定义区间时，≥-极限通常小于≤-极限）。在 一些情况下，在区间200-600可以发现单体单元的优选数目，这特别地应 用于在实验部分使用的聚乙烯醇。

载体中的聚合物的每单体单元的清除剂结构或亲核中心的适合的数目 还将取决于用途、清除剂结构以及中介物等，并且因此可以被发现于一个 宽的区间内，例如≤80%（例如≤50%或≤20%），典型的下限是0.01% 或0.1%或1%，其中100%对应于每单体单元的清除剂结构或亲核中心。 对于包含两个或多个亲核中心的清除剂结构，每单体单元的亲核中心的数 目可以超过100%，例如≥100%或≥125%或≥150%。

组合物的其他特征

AP作为一种AP-配制品存在于该组合物中，其中AP是：

a)处于干燥形式，例如游离颗粒，

b)处于溶解形式，典型地在一种水性液体介质中，以及

c)处于悬浮/分散形式，即作为悬浮于水性液体介质中的水不溶性颗 粒，

d)被附接至在水性液体介质中不溶的支持物上。

在此背景下，术语“溶解的”意味着AP作为一种溶质存在。AP颗粒 包括处于纯的形式或用一些固体材料稀释的AP。根据(b)所述的配制品 中的AP的有用浓度可以发现于一个宽的区间内。对于液体配制品，例如 0.1μg-100mg/mL的区间内。

除了AP之外，该组合物还可以包含缓冲剂、盐等，这些缓冲剂、盐 等是使患者体内的可接受的状况成为可能并且是AP与炎症相关中介物的 反应发生所需的。这些组分在AP-配制品中可以是与AP共配制的。

发明的组合物的一个潜在重要变体包括使交联载体聚合物的生产成为 可能的配制品，这些交联载体聚合物展示出可以用作清除剂结构的亲核结 构的多重性（WO2009108100，IPR-系统AB以及其中所引用的参考文件） 。交联可以发生在体内或离体。在这个变体中，发明的组合物的AP-配制 品由至少两个亚配制品表示：

1)包含大分子载体的第一亚配制品，该大分子载体展示出反应性亲 核基团的多重性，该反应性亲核基团具有充当用于上面所讨论的这些种类 的炎症相关中介物的清除剂结构的潜力，以及

2)包含交联试剂的第二亚配制品，优选处于聚合物的形式并且展示 出（包括）反应性亲电子基团的多重性，该反应性亲电子基团能够在水性 介质中与大分子载体的亲核基团反应，以在该大分子载体中引入共价的交 联。

第一亚配制品中的大分子载体可以在上面所讨论的大分子载体中选择 。当第二亚配制品中的交联试剂是聚合物时，该聚合物可以在上面所讨论 的聚合大分子载体中选择。

如果与反应性亲电子基团相比，在混合时反应性亲核基团是摩尔过量 的，那么通过将第一亚配制品与第二亚配制品进行混合而获得的交联载体 将包含多个清除剂结构。在此典型背景下，摩尔过量表示因子≥2，例如≥ 5或≥10或≥20的过量。如果恰当地选择起始载体和交联试剂，那么获 得的产物将原位形成水溶胶。

可以想到，当通过注射具有高分子量的透明质酸（所希望的聚合物） 的高度黏稠溶液来给予时，这种双组分组合物可以是有利的。透明质酸的 高度黏稠溶液难于注射并且透明质酸的给予通常与归因于炎症相关反应 的不良作用的风险相连接。这些问题可能通过在患者的相同位置注射包括 以下的组合物来减少：

a)第一亚配制品，其中该大分子载体是处于溶解形式的透明质酸的 低分子量变体（=具有的Mw低于所希望的透明质酸的Mw），以及

b)第二亚配制品，其中该交联试剂也是处于溶解形式的透明质酸的 低分子量变体，

其条件是

i)与第二亚配制品中的反应性亲电子基团相比，第一亚配制品中的 反应性亲核基团是过量的，并且

ii)在注射时，将这两个亚配制品相互混合时，相对于第二亚配制品 （交联试剂）的透明质酸上的反应性亲电子基团的取代度对于生产处于溶 解形式（即非凝胶形式）的载体是足够低的。

该混合导致反应性亲核基团和反应性亲电子基团之间的反应以形成共 价的交联结构。为了获得处于溶解形式（即非凝胶形式）的载体产物，相 对于其他反应变量，为了发现相对于第二亚配制品中的反应性亲电子基团 的最佳取代度，需要实验验证。

例如，这些亚配制品的注射优选地与在开始注射过程中或刚好在其之 前在使用的注射器中混合这些配制品平行进行。对于有待使用的这类注射 液以及注射器的技术在本领域是熟知的；参见例如WO2009108100（IPR- 系统AB）。

有效要素的合成

AP可以根据熟知的科学试验计划来合成，例如WO2009108100（IPR- 系统AB）以及其中所引用的参考文件中所给出种类的科学试验计划。

水不溶性支持物

如上所述，AP可以被固定于一种水不溶性支持物上。这种支持物材料 可以在具有以下特征中的至少一个或多个的支持物材料之中选择：a)处于 颗粒形式，b)分别允许或不允许水性液体和/或待中和的炎症相关中介物 渗透到该支持物的多孔的或非多孔的颗粒或整块料，c)坚硬的，d)柔软 的，e)弹性的，f)可压缩的，g)可凝胶化的（当被放置与水接触时，特 别形成一种水溶胶）等。这种支持物可以包括塑料、玻璃、矿物、金属等 。当AP的载体在水性介质中不溶时，这个载体本身可以定义其自己的固 体支持物。

支持物可以被设计为有待在正在遭受或处于有待治疗或预防的炎症相 关状况的风险中的个体体内使用和/或从其中分离的装置。典型的装置是具 有暴露在其表面上的AP的埋植剂，例如支架、人工血管、网、牙齿、骨 骼、关节等，贴剂、外科敷件、石膏、过滤器、缝合线、处于颗粒形式的 造影剂等。这还包括用于以下的过滤器和吸附性材料a)去除炎症相关中 介物和/或来自正在或将要使其与动物（包括人类）进行接触的非生物流体 的其他功能上类似的环境刺激物的活性，和/或b)离体用途，例如包括来 自生物流体的炎症相关中介物的去除，这些生物流体来源于个体并且随后 将要被送回到正在遭受或处于炎症相关状况的风险中的个体中。根据(a) 有待处理的非生物流体的典型实例是包含烟雾（例如烟草烟雾）的空气， 和工业废气。根据(b)有待处理的生物流体的典型实例是血液、血清、血 浆等。

适合的支持物典型地包括聚合材料，例如包括一种或多种选自与载体 聚合物所选的聚合物相同的聚合物。典型的载体聚合物是多糖，例如纤维 素、交联葡聚糖、琼脂糖（例如交联琼脂糖）等；聚酯聚合物，例如乳酸 共聚物（例如羟乙酸乳酸聚酯）、聚乙烯等。其他种类的支持物材料也可 以被使用，例如陶瓷材料、塑料、矿物材料、金属、复合材料、活性炭等 。这些材料的多孔形式可以被用作过滤器和/或吸附性材料。

到该支持物的附接可以根据本领域已知的技术通过将该支持物与AP 进行混合、涂层、浸渍等来完成。可替代地，AP的大分子载体可以是制 造支持物/装置的材料的部分。

使AP与炎症相关中介物进行接触（方法的步骤(ii)）

如上所讨论，AP与该中介物的接触可以发生于有待治疗的个体体内或 从其中分离。

在使其与该中介物进行接触的组合物中的AP的量在以下意义是有效 的：有待治疗的炎症相关响应被减轻和/或被中和至一个可接受的水平。用 于体内施用的适合的剂量（每次给予）取决于具体的医学指征、配制品（例 如种类、支持物材料、AP、清除剂结构、浓度等）等，并且因此可以在一 个宽的区间内进行选择，例如10^-12-10²g，10^-6-10^-3g是特别有意义的区间 。对于个别案例需要实验验证。

取决于具体的治疗的医学指征和/或使用的配制品，体内接触包括本发 明的组合物的全身地或局部地给予。当有待治疗的状况被集中于给予的区 域或位于对来自这个区域的AP可到达的位置时，典型地使用局部给予， 例如局部的、皮肤的、鼻的、玻璃体内的、关节内的、口腔的、直肠的、 骨内的等。当有待治疗的状况出现在局部给予不容易到达的位置时，主要 使用全身给予，例如肠胃外给予（例如静脉内给予和皮下给予）或肠内给 予（例如口腔给予）等。在不同的医学指征上比较下面的讨论。

在其中应用本发明会是感兴趣的医学指征是：

1.归因于手术过程中诱发的炎症反应或由炎性疾病导致的黏附的预 防，这些黏附例如由腹部手术或肠炎诱发的肠黏附、腱黏附等。AP可以 被局部地递送，例如在手术时递送至腹腔内。

配制品：溶液、分散体、凝胶（可能是原位形成的水溶胶）等。

给予：使用注射器或喷雾装置局部地给予。

2.脊髓损伤。AP可以全身地或局部地给予，优选在创伤后数小时内 的早期阶段，因此干扰氧化应激并且减少继发损伤过程。

配制品：溶液、分散体、凝胶（可能是原位形成的水溶胶）等。

给予：在损伤部位局部地给予，通过肠胃外静脉输注或输注进脑脊液 中全身地给予。

3.烧伤和其他大的创伤。已知这些状况引人注目地增强患者的全身 氧化应激。AP的全身递送对于改善恢复并且减少继发损伤过程可以是有 益的。

配制品：溶液、分散体等。

给予：全身地，优选通过肠胃外静脉输注。

4.再灌注损伤涉及包括严重影响组织和恢复的脂质过氧化产物的炎 症中介物。再灌注损伤例如在中风和脑创伤，而且在心脏骤停中发挥作用 。AP的给予可以帮助减少再灌注损伤。

配制品：溶液、分散体等。

给予：优选地通过全身肠胃外静脉或输注进脑脊液中。

5.衰老。这个过程影响所有活的动物，包括人类。氧化应激与对抗 氧化应激的生物保护之间的平衡逐渐被衰老破坏，导致氧化的蛋白和核酸 的累积。通过降低氧化应激并且减缓衰老，AP的全身递送可以潜在地部 分地恢复这种平衡。

配制品：溶液、分散体片剂等。

给予：全身的，优选通过口服并且肠胃外给予。

6.神经退行性疾病，例如阿尔茨海默症和帕金森病。增长的证据示 出神经元变性与包括增强的脂质过氧化终产物和脑中不溶性斑块的沉积 的氧化应激之间的相关性。通过AP的全身递送对这种级联的破坏可以阻 止神经退行性疾病的发展。

配制品：溶液、分散体片剂等。

给予：优选地通过全身口服或肠胃外静脉或输注进脑脊液中。

7.血管中的氧化应激和炎症。已知这导致可以通过全身地给予本发 明的AP来预防或治疗的内皮机能障碍和动脉硬化。

配制品：溶液、分散体片剂等。

给予：优选地通过口服或肠胃外静脉输注。

8.骨关节炎-风湿性疾病-局部软骨缺损。脂质过氧化产物在被损害软 骨的发育或软骨再生的缺乏中发挥必不可少的作用。AP向受影响的关节 的全身或局部递送可以通过中断对该关节的氧化应激来帮助修复软骨或 停止软骨降解。

配制品：溶液、分散体、水溶胶等。

给予：典型地局部关节内注射或全身口服或肠胃外给予。

9.哮喘和慢性阻塞性肺病（COPD）。这些是特征在于肺中的炎症的 常见疾病。包括脂质过氧化产物的氧化应激诱导促炎分子的产生。通过AP 的吸入的局部给予可以减少肺中的炎症。

配制品：溶液、分散体、颗粒等

给予：典型地通过吸入或肠胃外的或口服的全身的。

10.重度酒精摄入是与宿醉相关联的。在宿醉时，酒精代谢产物乙醛 及其浓度是最高的。经由AP的全身给予对乙醛的阻断因此可以减少与宿 醉相关联的症状。

配制品：溶液、分散体、糖浆、片剂、胶囊等

给予：全身的口服的或肠胃外的。

11.与环境刺激物（例如吸烟）相关联的疼痛，包括头痛和偏头痛。 来自烟草烟雾或其他环境刺激物的脂质过氧化产物（包括丙烯醛）可以诱 发疼痛。例如，丙烯醛可以经由特异性受体TRP l诱导降钙素基因相关蛋 白（CGRP）的释放。CGRP介导神经源性炎症和与头痛和偏头痛相关联的 脑膜血管扩张。在口腔和鼻粘膜局部地给予AP可以预防或治疗这种疼痛 。配制品：作为鼻腔或口腔喷雾、滴鼻剂、漱口液等的溶液、分散体、颗 粒等

给予：局部递送或全身口服的或肠胃外的。

12.白内障的特征在于晶状体中氧化蛋白的衰老相关累积，这可以通 过局部AP给予，例如眼药水来预防。

配制品：溶液、分散体、颗粒等。

给予：玻璃体内的或通过眼药水。

13.干眼与局部氧化应激相关联并且氧化反应产物的量在受影响的患 者的泪液中是增加的。AP的给予在这种疾病的治疗或预防中可以是有益 的。AP对于一般眼部不适的治疗也可以是有益的，例如归因于结膜和/或 角膜中的过敏的或炎性的反应的以及眼部手术之后的疼痛或刺激。

配制品：溶液、水溶胶

给予：作为眼药水或凝胶局部地给予。

14.腹膜透析在肾衰竭的治疗中是有效的。一些年后，归因于逐渐的 超滤衰竭，腹膜透析通常变得效果更差。来自透析溶液的氧化应激的后果 可以通过使用向该透析溶液中添加AP来预防，这可以减少带有更少纤维 的腹膜屏障的结构变化。

配制品：溶液、分散体、可分散性颗粒

给予：作为透析溶液的部分。

15.炎性肠病，例如克罗恩病（Crohns disease）和溃疡性结肠炎。这 些疾病可以潜在地通过AP治疗，优选地通过口服或直肠给予。

配制品：溶液、分散体、片剂、胶囊、糖浆等。

给予：口腔的，经直肠的或肠胃外的。

16.手术的或创伤的皮肤伤口愈合和改善的瘢痕形成。通过注射，AP 被局部地递送至伤口或切口部位。

配制品：溶液、分散体、凝胶（可能是原位形成的水溶胶）等。

给予：典型地局部皮下或皮内注射。

本发明可以向其应用的典型装置。

1.埋植剂。动物或人类中的埋植剂可以导致局部的或全身的炎症反 应。在埋植剂内掺合AP或用AP覆盖埋植剂的表面可以改善生物相容性 并且预防排斥或其他相关联的并发症。

2.固定于用于体外程序（例如血液透析和血浆去除术）的过滤器上 的AP可以捕获循环脂质过氧化产物，因此减少患者的氧化应激。

3.手术的或创伤的皮肤伤口愈合和改善的瘢痕形成。AP可以被掺合 进例如用作浸渍缝合线或外科敷件的手术装置中。

4.慢性的以及糖尿病的皮肤伤口。这些伤口是由向该皮肤区域的减 少的供血导致的。缺氧与增强的氧化应激以及脂质过氧化终产物的存在相 关联。通过使用功能化装置（例如敷件、石膏或颗粒）局部地给予AP可 以减少氧化应激并且改善愈合并且缩短伤口的愈合时间。

5.包含环境刺激物的流体。向来自香烟烟雾或其他环境污染物的丙 烯醛的暴露可以导致人类严重肺部损伤以及消极的全身作用。可以通过香 烟过滤嘴或设计带有AP的呼吸过滤器（例如功能化纤维素过滤器）来有 效地捕获丙烯醛。

实验部分

肼基甲酸酯-功能化聚乙烯醇（PVAC）的合成

将聚乙烯醇（5g，13-23kDa）溶解于二甲亚砜（100mL）中，同时 在氩气下、在80℃搅拌1小时。添加羰基二咪唑（10g）并且在室温继续 搅拌过夜。然后添加水合肼（10mL），将该反应搅拌过夜，并且通过在 乙醇中反复沉淀来收集并且纯化产物。取代度是通过进行在其他地方描述 的三硝基苯磺酸测定来用分光光度法确定的（Stephen L.Snyder and Philip  Z（史蒂芬L.斯奈德和菲利普Z.）.Sobocinski；Analytical Biochemistry（《分 析生物化学》）64,284-288,1975）。

实例1.在体外示出PVAC对丙烯醛-诱导的蛋白氧化的作用。

用25μL的0.2μΜ的丙烯醛在22℃对八十微克的人白蛋白处理8h 。蛋白氧化涉及羰基引入到在蛋白侧链中。这些羰基将与2,4-二硝基苯肼 （DNPH）反应，以给出2,4-二硝基苯腙（DNP-腙）（Oxyblot Protein  Oxidation Detection Kit（Oxyblot蛋白氧化检测试剂盒），Millipore（密理 博公司））。将被氧化的蛋白在12%聚丙烯酰胺凝胶上进行分离，转移至 聚偏二氟乙烯膜（Hybond-P（尼龙膜-P），GE Health Care（GE医疗保健）） 并且使用抗-DNP抗体随后是HRP-标记的第二抗体进行蛋白印迹，并且通 过使用ECL方法视觉化。制备具有肼基甲酸酯的浓度为1mM和10mM 的PVAC（12.7%取代度）的溶液，并且在向这些样品中添加丙烯醛之前 将其与白蛋白混合。与对照比较，这些印迹示出在PVAC处理样品中的减 少的蛋白氧化并且该作用是剂量依赖性的。

实例2.在大鼠伤口愈合模型中证明的PVAC的抗炎作用。

炎性皮肤反应是由手术全厚皮肤切口和使用可再吸收的羟乙酸乳酸聚 酯（4.0Vicryl（4.0薇乔），Ethicon（爱惜康公司））的后续闭合诱发的 。在这个实验组中，通过在室温、在PBS（32mM肼基甲酸酯浓度）中的 16.5mg/mL的PVAC中培育1小时来用PVAC（10%的肼基甲酸酯基团的 取代度）对缝合线进行处理，并且将这些缝合线过夜风干。在对照组中， 缝合线使用16.5mg/mL的非修饰PVA以相同的方式进行处理亦或不经处 理。手术之后五天大概地检查炎性反应，其中与对照比较，用PVAC-浸渍 的缝合线闭合的伤口几乎没有发红或肿胀。组织学图片也证明了在这个时 间点，更少的炎症细胞（巨大细胞不存在于PVAC组中），这验证了PVAC 的抗炎作用。在伤口愈合过程中的炎症的抑制似乎还影响后面的瘢痕形 成，这是在8周后，在一个PVAC-处理部位几乎不可见瘢痕的动物上示出 的。

实例3

PVAC的抗炎作用的临床验证是在一个人类皮肤愈合模型中示出的。 这个实验是如实例2中所描述的来进行的，具有以下例外：向皮下脂肪的 实验全厚皮肤切口的长度为4cm，并且通过PVAC处理的薇乔4.0（vicryl 4.0）皮内缝合来闭合，而不是经皮肤的单缝合线来闭合。对照切口通过未 处理的缝合线来闭合。1周后的大概检查证明，在PVAC处理部位几乎没 有炎症（包括肿胀和发红）的体征；然而在对照中，手术切口和缝合线诱 发了明显的炎性反应。

实例4

证明了PVAC对来自香烟烟雾的丙烯醛介导的蛋白修饰的作用。浓度 为4mg/mL（10mM）并且体积为200μL的PVAC被分散于过滤嘴香烟（万 宝路（Marlboro））中的过滤嘴中，并且允许在室温风干4h。来自PVAC- 处理的香烟或未处理的对照的烟雾随后被空气鼓泡至PBS中的人血清白 蛋白的溶液（4ug/ml，Sigma-Aldrich（西格玛奥瑞奇公司））中。随后使 用小鼠抗丙烯醛抗体（Abeam（阿伯姆），Cambridge（剑桥），U.K）和 HRP-标记的抗小鼠第二抗体（R&D系统，Minneapolis（明尼阿波里斯市）， MN，U.S.A.）通过蛋白印迹对烟雾处理的白蛋白溶液进行分析。这些信号 使用ECL方法进行视觉化。这些结果示出与未处理的对照比较，PVAC- 处理组中的丙烯醛修饰的白蛋白减少了30%-50%。

尽管本发明已经被描述并且指出（参见其可操作性实施例），但是本 领域的普通技术人员应该理解在不偏离本发明的精神下可以做出不同的 变化、修改、取代和省略。因此本发明旨在包括下面紧跟的那些权利要求 范围之内的等效物。