一种成釉细胞的分离培养方法

摘要

本发明涉及一种成釉细胞的分离培养方法，具体地说，是涉及一种采用体视显微镜下分离牙胚组织和酶消化法分选相结合分离培养高纯度成釉细胞的方法。该方法的步骤为：体视显微镜下分离小鼠牙胚后，采用单克隆法原代培养成釉细胞，用更换培养液类型、差别消化法进行纯化，在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况，用免疫荧光法检测细胞表达釉原蛋白、成釉蛋白和细胞角蛋白14的情况。原代培养的成釉细胞生长良好，纯化后间充质细胞明显减少，上皮细胞呈片状生长，表达角蛋白，釉原蛋白以及成釉蛋白。体外培养的人成釉上皮细胞在较长时间内可保持其特性。建立人牙源性上皮细胞的体外培养方法，为牙齿组织工程研究提供可靠的种子细胞来源。