一种成纤维细胞生长因子II型受体IIIb剪切体的构建方法

摘要

本发明一种成纤维细胞生长因子II型受体IIIb剪切体的构建方法，包括以下步骤：FGFR2 IIIc表达载体的获得与测序鉴定；FGFR2 IIIb 3-11外显子片段的获得；FGFR2 IIIb腺病毒表达载体的构建；FGFR2 IIIb腺病毒的包装。利用本发明构建的成纤维细胞生长因子II型受体IIIb剪切体，采用昆明白小鼠进行实验表明，博莱霉素60mg/kg体重气管内灌注在第3-4周能引起较明显的肺纤维化发生；采用前述构建的KGFR腺病毒表达载体，通过96孔板荧光计数法检测Ad-KGFR病毒原液的滴度为3 106PFU/mL。以该滴度的KGFR腺病毒300ml与博莱霉素(60mg/kg体重)共同气管内灌注，分别于1，2，3，4周后HE染色观察肺纤维化发生情况。结果表明，KGFR的表达增强后，博莱霉素作用后不同时间肺纤维化的发生有较明显的减轻。