非强启动式的外源基因表达法及其在具有毒性的目标蛋白表达中的应用

摘要

本发明公开一种非强启动式的外源基因表达法及其在CHO细胞中的应用该方法，通过定点整合的方式，将外源蛋白编码序列定点整合插入至宿主细胞自身基因的启动子下游，并利用宿主自身基因的启动子以及相关转录起始或翻译起始调控序列实现外源基因的转录、表达。利用宿主细胞自身的启动子以及调控机制，实现外源基因非强启动式的表达，从而避免由于外源毒性蛋白在宿主细胞强启动式表达造成的细胞死亡，和加速死亡，实现先增殖后表达，从而在宿主细胞生长后期获得大量毒性目标蛋白。填补了目前现有技术中的空白，为有关毒性蛋白基因工程技术的研究发展开拓了新的方向。