小鼠Tmem240重组真核表达质粒、慢病毒及构建方法

摘要

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及小鼠Tmem240重组真核表达质粒、慢病毒及构建方法。本发明重组真核表达质粒是将SEQ ID NO.1序列插入pEGFP‑N1载体的XhoI位点和EcoRI位点之间获得。慢病毒构建是以pEGFP‑T240‑N1质粒为模板，利用引物引物对1进行PCR扩增，合成含有APEX2的目的片段；对载体pLVX‑EGFP‑N1进行双酶切；对Tmem240片段进行双酶切；对含有APEX2目的片段进行双酶切；对酶切产物Tmem240片段，含有APEX2目的片段及载体pLVX‑EGFP‑N1回收、T4连接酶连接、感受态细胞转化，并进行菌落PCR验证；质粒提取，并测序，得到构建成功的pLVX‑T240‑APEX2‑EGFP，将其与psPAX2、pMD2.G质粒共同转染至293Ta细胞，并收集获得。