一种提取、分离和培养同体异种肝原代细胞的方法

摘要

本发明属于细胞培养技术领域，一种提取、分离和培养同体异种肝原代细胞的方法，包括以下步骤：(1)灌流液经肝门静脉原位灌注，(2)消化液经肝门静脉原位灌注，(3)肝脏离体，撕碎包膜，过筛获得包含多种肝原代的细胞悬液，(4)获得的细胞悬液常规离心，获得实质细胞和收集的上清液，(5)上清液经密度梯度离心分离出星状细胞和剩余下层细胞悬液，(6)剩余下层细胞悬液分别与连接有肝血窦内皮细胞和枯否细胞特异性的免疫磁珠孵育，经磁场分选后分别获得肝血窦内皮细胞和枯否细胞。肝原代细胞分离后，立即重悬于对应的专门配制的培养基中培养。本发明细胞得率高，分离效果好，为体外构建多细胞肝脏模型提供了稳定的细胞来源。