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ラット小腸上皮細胞膜上には耐熱性エンテロトキシン誘導体との結合様式を異にする二種の受容体が存在する

机译:在大鼠小肠上皮细胞膜上具有耐热肠毒素衍生物的结合模式有两种受体。

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摘要

ブタ由来毒素原性大腸菌の産生する耐熱性エンテロトキシンの誘導体(STpアナログ)と特異的に結合するラット小腸上皮細胞膜上の蛋白について研究を行った。 膜標品への結合実験から,STpアナログとクロスリンクされる蛋白として120kDa,65kDa,55kDa蛋白が検出された。これらのうち主要なタンパク質は65kDaと55kDaタンパク質であり120kDaタンパク質は少量であった。 65kDaタンパク質が交換性結合能をもち,55kDaタンパク質が非交換性結合能をもつことが示唆された。 膜標晶を用いた蛍光標識化STpアナログと非標識化STpアナログとの交換実験から,交換性結合様式の解離定数としてKd=9.0nMが得られた。 一方,部分精製された受容体はSTpアナログに対し特異的な結合をするが,非交換性の結合様式をもっていた。 この受容体のSTpアナログに対する結合定数はKa=2.1nMであると見積もられた。 部分精製受容体と蛍光標識化STpアナログとの複合体からクロスリンクにより検出されたタンパク質は50kDaではなく,32kDaタンパク質であった。 この結果からSTpに対して非交換性結合様式をもつ受容体は32kDaタンパク質であることがわかった。 また,55kDaタンパク質は膜上で32kDaタンパク質と複合体を形成しているか,あるいは,近傍に存在しているタンパク質であると推定された。
机译:在大鼠小肠上皮细胞膜上进行研究,该蛋白质小肠上皮细胞膜,其特异性结合由猪衍生的毒液大肠杆菌产生的耐热肠毒素的衍生物(STP类似物)。从对膜制备的结合实验,将120kDa,65kDa和55kDa蛋白被检测为与STP类似物交联的蛋白质。其中,主要蛋白质为65kDa和55kDa蛋白,少量120kDa蛋白。已经提出,65kDa蛋白质具有可交换的结合能力,并且55kDa蛋白质具有不可交换的结合能力。通过使用膜标记的STP模拟的荧光标记的STP模拟和未标记的STP模拟的Exchange实验,获得KD = 9.0nm作为可互换耦合模式的解离常数。另一方面,部分纯化的受体具有特异性结合STP类似物,但具有不可交换性。估计该受体的STP类似物的结合常数为Ka = 2.1nm。与部分纯化受体的交联从复合物检测的蛋白质和荧光标记的STP类似物不是50kDa,而是32kDa蛋白质。从该结果中,发现具有非交换性结合模式的受体是STP的32kDa蛋白。此外,估计55kDa蛋白质以在膜上或附近存在的蛋白质上形成32kDa蛋白质的复合物。

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