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第六次人畜共患病学术交流会

召开年：2004
召开地：合肥
出版时间： 2004-09-01

主办单位：中国畜牧兽医学会

会议文集：人畜共患传染病防治研究新成果汇编

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1.H5亚型禽流感病毒分离与鉴定
- 梁基;李天松;孟日增;周宇;王伟利
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本实验室在检疫过程中从临床健康的鸡群分离到一株病毒,经过AIV荧光RT-PCR试验、血球凝集试验和血球凝集抑制试验鉴定为H5亚型禽流感病毒.又经鸡胚半数致死量(ELD<,50>)试验和致病性试验定为高致病性H5亚型禽流感病毒.
2.H5亚型禽流感病毒基质蛋白单克隆抗体的制备及初步应用
- 郭闯;王永坤;朱国强
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：用禽流感病毒番鸭分离株ZM(A/Muscovy/Zhejiang/2000(H5N1),接种11日龄SPF鸡胚,收集死亡胚尿囊液经适当方法处理后作为免疫原免疫BALB/C小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,细胞融合后经间接ELISA检测,得到一株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为B<,2>B<,11>,制备的单抗腹水效价为18Log2.免疫印迹(Western-Blot)和琼脂扩散试验表明所得单抗是针对禽流感H5亚型病毒的基质蛋白(M蛋白)的M<,1>及M<,2>的.单抗的热稳定性结果表明,腹水单抗分别在37℃、25℃、4℃放置20天,其ELISA效价与-20℃冻存保存的腹水单抗的ELISA效价(1:262144)无差别,说明腹水单抗具有良好的热稳定性.抗体分泌稳定性结果表明,杂交瘤细胞体外连续传代80天后以及液氮冻存的杂交瘤细胞6个月后复苏,仍具有稳定的抗体分泌能力.细胞上清抗体ELISA效价为1:256,腹水单抗ELISA效价仍不小于1:262144.单抗的特异性试验结果表明单抗只与H5亚型的禽流感病毒反应,而不与其它禽类病毒反应.单抗的所有这些特性为将以此单抗介导的快速诊断H5亚型禽流感的相关研究奠定了坚实的基础,将有良好的应用前景.
3.O型口蹄疫病毒(FMDV)不同基因型联合RT-PCR检测方法的建立
- 葛淑敏;金宁一;尹革芬;郑敏
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：在大量比较国内外口蹄疫病毒(FMDV)流行毒株序列的基础上自行设计了检测FMDV及O型口蹄疫病毒不同基因型即:中国型(Cathay)与泛亚株(PanAsia)的二联PCR引物.本试验确定了单项RT-PCR反应条件范围,在此基础上建立、优化了二联RT-PCR反应体系和反应条件,相关病毒检测试验证实了该方法的特异性和敏感性,成功建立了检测O型FMDV中国型与泛亚株的二联RT-PCR方法,为口蹄疫的诊断防制、流行病学调查及疫苗的使用奠定了基础.
4.O型口蹄疫病毒VP1嵌合基因的构建及原核表达
- 郑敏;金宁一;鲁会军;韩松;金扩世;李昌
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：首先合成我国O型口蹄疫病毒两疫苗毒株VP1基因的三个抗原表位,与另外扩增的流行毒株VP1基因末端273bp片段相连,构建出O型VP1嵌合基因片段(VP10).然后,将VP10基因连接到原核表达载体pET28a上,构建了重组表达质粒pET28a-VP10,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.SDS-PAGE电泳表明,VP10基因在大肠杆菌中获得表达.Western-blotting检测证实表达的VP10蛋白具有良好的生物学活性.最后,对表达蛋白通过包涵体洗涤的方法进行初步纯化,获得了较高纯度的VP10蛋白.
5.O型口蹄疫病毒中国株、泛亚株VP1基因的克隆与原核表达
- 韩松;金宁一;鲁会军
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：根据口蹄疫中国株(中国型)、泛亚株(中东-南亚型)流行毒株设计一对包含VP1部分基因编码区的特异性引物,扩增出VP1基因633bp的特异带,并将纯化的扩增产物克隆到pMD18-T载体上.再用设计的酶切位点将VP1基因连接到原核表达载体pET28a上,构建了重组质粒pET28a-VP1,转入BL21菌中进行原核表达.SDS-PAGE电泳表明,VP1基因在表达系统中高效表达.最后,对表达的蛋白通过包涵体洗涤及切胶纯化的方法进行纯化,获得了高纯度的VP1蛋白.
6.PCR技术检测沙门氏菌链霉素、卡那霉素耐药基因(aadA、aadB)的研究
- 张之文;王红宁;代敏;李春
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究以不同规模化猪场分离的16株猪源致病性沙门氏菌为材料,根据GenBank中注册的沙门氏菌aadA(3'-O腺苷酸转移酶,编码链霉素耐药)和aadB(2'-0腺苷酸转移酶,编码卡那霉素耐药)的基因序列,分别设计aadA基因和aadB基因的引物,对链霉素耐药基因aadA和卡那霉素、庆大霉素耐药基因aadB进行PCR检测,结果表明:10株耐链霉素的菌株中9株呈现阳性,aadA基因的检出率为90﹪;9株耐卡那霉素菌株中7株呈现阳性,aadB的检出率为77.8﹪.
7.RNAi技术及其在寄生虫研究中的应用
- 刘文森
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：RNA干涉是通过双链RNA介导的特异性转录后基因沉默.RNAi在维持基因组稳定、保护基因包免受外源核酸侵入、基因表达调控等方面具有重要生物学作用,已被广泛用于基因功能研究、基因治疗和新药研究与开发等方面,在寄生虫研究中前景广阔.
8.SARS病毒N蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定
- 王瑞琳;金宁一;赵博;金洪涛;王宏;郑敏
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：将编码SARS病毒核衣壳蛋白(N蛋白)全基因进行人工合成,克隆到pET-28a(+)和pETcks载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.利用SARS患者恢复期已知的SARS抗体阳性血清,鉴定重组蛋白.SDS-PAGE表明所表达的重组蛋白相对分子质量约为55000,与预计相符,SARS患者血清与重组蛋白反应,在相对分子质量55 000处形成特异性的反应条带.最后,对表达蛋白通过包涵体洗涤进行初步纯化,为进一步研究SARS病毒感染免疫应答机制和制备SARS病毒的重组疫苗奠定基础.
9.SARS冠状病毒N蛋白基因的克隆、序列分析及其在E.coli中的表达与初步应用
- 杨松涛;夏咸柱;乔军;高玉伟;阎芳;谢之景;赵忠鹏;黄耕
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：对SARS核蛋白基因进行了克隆和序列测定.根据GenBak中报道的SARS-Tor2株核蛋白基因(N)序列,设计了一对特异性引物,对SARS病毒进行了RT-PCR扩增;将扩增得到的PCR产物纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pGEM-N,进行核苷酸序列测定,并与SARS其他3个标准毒株的N基因进行了比较.结果该基因全长1269bp,编码422个氨基酸,核苷酸的同源性为100﹪;推导的氨基酸序列的同源性为100﹪.将pGEM-N双酶切,回收目的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-N,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行了诱导.结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为53kDa的重组蛋白,名疫印迹法证实该重组蛋白可以与SARS免疫血清发生特异性反应.经凝胶薄层扫描,重组N蛋白表达量可占菌体蛋白的43﹪.初步建立了用N蛋白检测SARS冠状病毒的间接ELISA方法.
10.埃博拉出血热研究进展
- 孙树民;丁壮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：埃博拉病毒的基因编码产物,可以导致细胞死亡的大量增加,这种细胞死亡有明显的磷酸化依赖性,这也可能是EBV感染具有高度致死性的原因之一.
11.埃立克体病的研究进展
- 陈超;丁壮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：为普及对埃立克体病的认识,提高鉴别能力,深入开展我国人类埃立克体病的系统研究,本文就埃立克体病的国内外研究进展综述.
12.斑点免疫金渗滤法快速检测鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌抗体的应用研究
- 曹春梅;焦新安;潘志明;黄金林;张晓明;刘秀梵
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：将鸡伤寒沙门氏菌Sg9脂多糖(LPS)抗原包被于渗滤盒检测区(T区),针对沙门氏菌O<,9>抗原单克隆抗体3-47-0包被在质控区(C区),用胶体金标记鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原,建立了一种抗原夹心法快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA).人工感染鸡试验表明,DIGFA在感染后第7天即可从32只鸡中的7只检测到抗体,在时间上早于玻板凝集试验(PAT).722份现场检测血清的检疫结果表明,斑点免疫金渗滤法比PAT有更高的阳性检出率,阳性样品抗体算术平均滴度DIGFA大于PAT法.本文建立的DIGFA快速、灵敏、准确,给鸡伤寒和鸡白痢的早期诊断提供了一个新的有效手段.
13.北方部分地区汉坦病毒的分离与鉴定
- 屈勇刚;剡根强;张永振;张再清
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究采用VeroE-6分离培养对疫区所获的部分标本进行了病毒分离,对所分离的毒株主要采用了免疫荧光技术、RT-PCR分型技术进行了鉴定和分型.结果从阳性鼠肺分离到8株病毒,从病人血清分离到1株病毒.经鉴定均为SEO型汉坦病毒.
14.表达狂犬病毒糖蛋白抗原的重组犬2型腺病毒的构建及鉴定
- 赵忠鹏;夏咸柱;扈荣良;张守峰;袁慧君;谢之景;闫芳;黄耕;杨松涛
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：通过常规分子生物学方法,先将狂犬病毒糖蛋白(Rgp)基因从含有狂犬病毒SRV<,9>株糖蛋白基因的pGT质粒克隆至pVAX1,再通过E3缺失穿梭质粒pVAXΔE3,构建成pVAXΔE3Rgp,然后再通过酶切连接将其克隆入犬2型腺病毒骨架质粒pPoly2-CAV2中,获得重组质粒pPoly2-CAV2-ΔE3-Rgp.最后再从pPoly2-CAV2-ΔE3-Rgp中释放E3缺失区域含有Rgp表达盒的重组犬2型腺病毒基因组CAV2-ΔE3-Rgp,转染DK细胞系,获得E3缺失区域含有Rgp表达盒的重组犬2型腺病毒CAV2-ΔE3-Rgp.该重组病毒能在DK细胞上产生典型的腺病毒细胞病变.通过酶切、PCR、基因测序,表明该重组病毒含有完整的Rgp表达盒.通过RT-PCR、Western-blot等检测,表明该重组病毒表达Rgp抗原.
15.表达犬细小病毒VP2蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定
- 谢之景;夏咸柱;扈荣良;闫芳;赵忠鹏;黄耕
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本实验对CAV-2 E3区的Ssp I片段进行了缺失,构建了E3区部分缺失的载体pVAXΔE3.然后用Sph I+Nde I对pVCPV-VP2进行双酶切,进行凝胶电泳回收CPV VP2表达盒,并对两端进行平滑化,用Ssp I对pVAXΔE3进行酶切,将载体线性化,去磷酸化,然后将CPV VP2表达盒克隆入pVAXΔE3的E3缺失处,并筛选表达盒方向与E3区转录方向一致的重组子,获得含有CPV VP2表达盒的穿梭载体pΔECPV-VP2.再用Sal I+Nur I分别对pΔECPV-VP2和pPoly-2-CAV2进行双酶切,分别进行凝胶电泳回收目的片段,将含有CPV-VP2表达盒的Sal I+Nru I片段定向克隆入pPoly2-CAV2,获得了在E3区缺失处插入CPV VP2表达盒的重组CAV-2基因组载体pCAV-2/CPV-VP2.用Asc I+Cla I对pCAV-2/CPV-VP2进行双酶切,释放CAV-2/CPV-VP2重组基因组.将CAV-2/CPV-VP2重组基因组与去除Sal I+Nru I片段的CAV-2基因组的两个片段按摩尔比1:1:1混合,利用脂质体介导共转染DK细胞,获得了重组活病毒CAV2/CPV-VP2.
16.不同种志贺氏菌对SPF鸡的致病性研究
- 许兰菊;梁宏德;王川庆;王平丽;员荣耀;高晓飞;赵金羽
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本试验用两种不同的志贺氏菌分别对3日龄SPF雏鸡进行人工接种,攻毒后观察其症状和病理变化.结果主要症状为拉稀,重要有脓血便,甚至死亡.剖检病变特征为肠道出血,肝、肺淤血坏死,脾肿大.镜检病变主要为肠粘膜上皮细胞脱落坏死,固有层部分脱落,并有炎性细胞浸润.研究结果表明:不同种志贺氏菌对雏鸡具有明显的致病作用,主要表现在肠道.
17.布鲁氏菌病流行现状和防治建议
- 孙广力;魏萍;孙刚;李书华;杨本
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：布鲁氏菌病曾经在世界范围内流行,据报道有123个国家发生过布鲁氏菌病.我国内蒙、东北,西北等地区增长期流行该病.改革开放以来,我国布鲁氏菌病防治工作取得巨大成果,人、畜发病率逐年下降,基本控制了该病的流行.但是,自20世纪90年代末以来,全国人布鲁氏菌病发病率出现持续上升;动物布鲁氏菌病在2001年、2003年连续两年无疫情报告后,2003年部分省市再次出现疫情暴发.上述情况反映了布鲁氏菌病防治工作的艰巨性,急需引起充分的重视.
18.当前流行的几种鹅传染病防治
- 张永国;孙刚;田松;孙光;任征
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：养鹅是畜牧业的一个重要组成部分,特别是我国近几年来养殖业结构的调整,更显出其重要性.鹅传染病在禽类传染病中算少的,但随着规模化、集约化养鹅业的发展,由于种苗及产品的流通,缺少规模化后的科学管理以及对疫病的研究较少,使饲养户及基层畜牧兽医工作者对疫病缺乏了解,而造成疫病的流行及不必要的损失.鹅传染病与其他禽类传染病一样,老病未能消灭控制,新疫病也不断发生.本文介绍几种危害最大的传染病供参考.
19.登革热研究进展
- 丁壮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：登革热作为一种严重的疫毒性疾病,已经引起热带及亚热带国家和地区的重视.但目前对于严重的临床病例尚无有效的治疗手段,而疫苗的研制尚停留在实验室阶段.因此,加大对登革热病毒的血清学检测、流行病学监测以及免疫病理的研究将有助于对其预防和控制.
20.对高致病禽流感流行特点的认识与分析
- 甘孟侯
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：流感病毒是正黏病毒科的重要成员,可感染人和多种动物,危害十分严重.自1878年在意大利发生以来,已有100多年的历史,每隔一定的时间就会在世界不同地区发生.进入20世纪80年代以来,高致病性禽流感的发生频率有所增多,造成的危害更为严重.自2003年2月底,荷兰、比利时、德国和韩国相继暴发高致病性禽流感,特别是2004年初开始在亚洲多个国家暴发的H<,5>N<,1>血清亚型的高致病性禽流感,传播快、范围广,已经成为危害禽类与人类健康的地区流行重大疫病.现仅就禽流感的部分流行特点进行分析,希望能对我国的养禽业的健康、持续发展有所帮助.
21.鹅禽流感防制的探讨
- 王永坤;钱钟;秦淑美;王晖;田慧芳
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：由于禽流感病毒亚型多,毒株异变,同一亚型不同毒株的致病性和免疫性存在差异;禽流感病毒特别是高致病性毒株对禽组织器官损害严重,但不同毒株损害组织器官也存在差异,尤其是脑炎型毒株对脑组织和心脏器官损害最严重;禽流感病毒免疫性与禽类其他病毒相比,可能差些,灭活苗免疫期相对比较短;高致病性禽流感病毒随着流行发生,对禽类感染谱在扩大,致病力在增强,死亡率在增高.以上的特性是防制工作必须研究考虑的基础.
22.鹅源高致病性禽流感病毒的分离与鉴定
- 王伟利;孟日增;李天松;周宇;梁基
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：禽流感的易感动物为家禽及野禽,也可以感染人及其它哺乳动物.水禽易感性稍差,而且水禽感染禽流感病毒以后,多数是隐性感染,是禽流感病毒的携带者和传播者.本试验从发生疑似禽流感病的鹅群分离到一株病毒,经初步的鉴定为禽流感病毒.
23.二重PCR检测致病性大肠杆菌、沙门氏菌对磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2、Sul3)的研究
- 羊云飞;王红宁;马孟根;李成忠
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究以从规模化猪、鸡场分离的33株沙门氏菌和103株大肠杆菌为材料,根据国内外在Genbank中注册的沙门氏菌、大肠杆菌对磺胺类药物的耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行比对分析,设计和建立检测磺胺耐药基因的二重PCR的方法.通过与单重PCR结果的比较和扩增产物的序列分析结果表明,二重PCR方法与常规PCR的结果符合率为98.05﹪,具有很高的一致性;与药敏试验的符合率达84.8﹪~100﹪,具有较高的特异性,检测速度有了较大的提高.
24.防制猪流感的公共卫生学意义
- 查红波;刘尚高
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：禽流感、人流感病毒可传染给猪.猪流感病毒可传染给禽、人,造成禽流感、人流感的发生.猪在禽—猪—人的流感病毒种间传播过程中,扮演着中间宿主和多重宿主的角色,猪是人与禽流感病毒基因重排的重要场所,是人流感病毒和禽流感的混合器.猪流感病毒流行历史较长,且易发生变异.预防禽流感、人流感,应加强猪流感的监测、防制工作.
25.非典(SARS)和禽流感(AI)暴发对兽医工作的警示
- 黄引贤;蒋荣彪;朱卫萍;卢体康
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：近年来在全球多个国家陆续暴发的SARS、AI等人畜共患疫病,不但对世界经济造成了巨大损失,而且对人类的生命带来了严重威胁.这确实给了我们许多警示,使我们深刻认识到兽医工作是一项事关人类生命安全和动物健康的重要、神圣的工作,迫使我们不得不对兽医的作用和定位给予重新的认识,对动物病原微生物的变异给予高度的关注.
26.非溶血性致病性链球菌的分离及其意义
- 胥桂华;米宏有;刘中宇;曹志丹
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：2002年,我们对通化某猪厂病死仔猪进行解剖,分别从脑、关节、肺部分离出猪链球菌.该菌株具有很强的致病性,并有该菌感染的典型症状,而在血液琼脂培养基上不发生溶血现象.用该菌株制成灭活疫苗在该猪场试用明显优异于商品苗的免疫效果.
27.高致病性禽流感与人类健康
- 赫崇礼;常永成
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：高致病性禽流感已经给许多国家和我国养禽业造成巨大损失,并将是21世纪养禽业面临的最大的疫情威胁.另一方面,高致病性禽流感病毒不仅作为人流感的最大基因库而间接威胁人健康,而且可作为人类的新病源而直接构成对人类的威胁.因此,要加大高致病性禽流感防治的力度,正视其长期性、艰巨性和复杂性,明确其方向和重点,采取切实而有效的措施,尽快改变高致病性禽流感防治工作的被动面.
28.冠状病毒病的研究进展
- 程淑琴;丁壮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：为了控制各种动物冠状病毒感染,目前广泛应用相应的弱毒苗和灭活苗,前者的接种途径主要是口服,禽类可滴鼻、点眼;后者则进行皮下、肌肉或腹腔内注射.但使用弱毒苗时,免疫效果受母源抗体的影响较大,同时存在疫苗毒力返强或与强毒发生基因重组的危险;灭活苗的免疫效果相对较差,主要因为细胞免疫力较弱、局部免疫机制不能建立的缘故.近年来,针对各种动物冠状病毒的防治,含有保护性抗原的转基因植物、DNA疫苗、活病毒载体疫苗、细菌载体疫苗等,已经进行了大量的研究,相信未来一段时间内会有好的产品走向市场.
29.国产狂犬疫苗免疫犬抗体监测试验报告
- 周桂兰;祝俊杰;赵景义;郑瑞峰;王卫东;江翠兰;吴小红;刘景华;赵民;于垡
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：国产狂犬弱毒疫苗第1次免疫接种后6个月,经小鼠中和试验监测免疫犬血清抗体,28.57﹪的犬免疫抗体高于0.5IU/ML.半年后进行第2次免疫,81.82﹪的犬免疫抗体高于0.5IU/ML.
30.活体电穿孔法导入DNA:牛结核病免疫接种新技术
- 姜秀云;何昭阳
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：通常认为DNA疫苗对大型动物的免疫效果不如小鼠,原因可能是DNA疫苗在大型动物体内的转染率和质粒载体表达水平较低,电穿孔法是一种能在体内有效提高质粒基因表达水平的方法.本文利用23篇参考文献对活体电穿孔法导入DNA进行牛结核病免疫接种新技术进行综述.
31.鸡致病性大肠杆菌O<,1>、O<,2>和O<,78>的Ⅰ型菌毛结构基因表达载体的构建及表达产物的检测
- 李尚波;王文成;张贵刚
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：用限制性内切酶SacI和BamHI双酶切克隆有鸡致病性大肠杆菌分离株O<,1>、O<,2>和O<,78>的piliA基因的质粒pTFimO1、pTFimO2和pTFimO78,分别回收从此3质粒上切下的545bp的piliA基因片段,再将载体pET-28a(+)用SacI和BamHI双酶切,最后将pET-28a(+)DNA片段与545bp的piliA DNA片段进行连接,转化至受体菌BL21(DE3)中,经SacI和BamHI酶切反应鉴定重组子,得到了理想重组子质粒pETFimO1、pTFimO2和pTFimO78.重组菌株BL21(DE3)(pETFimO1)、BL21(DE3)(pETFimO2)和BL21(DE3)(pETFimO78)经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PAGE检测,结果表明重组菌株可以良好地表达鸡致病性大肠杆菌I型菌毛蛋白.
32.集约化兔场高致病性痢疾志贺菌的分离与鉴定
- 蒋建军;康立超;剡根强
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：石河子某大型规模化养兔场陆续发生一种高发病率、高死亡率的兔病.临床表现为皮下出现大小不一的脓肿,浓汁呈干酪样,尤其在颈部、背部和四肢较多发.食欲和精神无明显变化,病初体温升高.最后浓肿破溃,肌肉萎缩消瘦而死.经细菌培养、形态学观察、动物实验、药敏实验以及生化特性鉴定和血清不实验最终确定为痢疾志贺菌.此菌对多种常用抗生素能产生耐药性,但对红霉素及部分人医用药品较敏感.
33.家禽与马的西尼罗病毒感染
- 魏荣;王志亮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：西尼罗河病毒是黄病毒科日本脑炎病毒血清群的成员,库蚊属的蚊子是其主要的传播媒介,鸟类是该病毒的中间宿主,而人和马则是终端宿主.导致人类、马和鸟类发生严重脑炎症状并造成死亡的大规模暴发从1996年开始则于欧洲、中东、西亚、俄罗斯和北美等地区和国家频频发生,在世界范围内引起人们的高度关注,尤其在美国和加拿大已被列为头号人畜共患病,开展了多方面多层次的研究与监测.
34.降低奶牛结核病误检率的研究和应用
- 卫龙兴;顾炳龙;姚龙涛
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：该课题组自1996年以来,结合全区的奶牛结核检疫,针对可能造成误判的因素,进行了一系列的试验,摸索出了一整套降低奶牛结核病误检率的综合措施,并在实际应用中取得了较大的成果.
35.警惕狂犬病疫情的发生与流行
- 刘仁凯;林洪强;金玉亮;高天宇
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：改革开放以来,随着人们生活水平的日益提高,宠物犬已走入寻常百姓家,成为人们生活中的伴侣.食用犬的养殖已成为丰富人们餐桌,致富奔小康的又一途径.可以说,在市场经济杠杆的作用下,今后犬类动物的饲养、经营将会继续保持上升态势.因此,必须高度重视狂犬病防治工作,警惕狂犬病疫情的发生与流行.
36.抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 曾艳兵;焦新安;潘志明;黄金林;张苏华;孙泉云;刘秀梵
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：以AIV H9亚型油乳剂灭活疫苗作为免疫原,免疫8wk BALB/c小鼠.采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗AIV H9亚型血凝素蛋白的mAb;采用ELISA和血凝抑制试验(HI)检测腹水mAb的效价;采用ELISA、HI、免疫荧光染色(IF)及Western-blot鉴定mAb的特异性.获得3株可稳定分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株2A3、2H1和1C8,其腹水mAb的效价依次为1×10<'7>、1×10<'5>和5×10<'6>,血凝抑制效价为1×2<'8>~1×2<'13>;3株mAb的Ig亚类均为IgG<,1>.以2H1 mAb进行Western-blot的结果显示,该mAb能与AIV的75kd的蛋白条带起反应,表明其是针对AIV H9亚型血凝素蛋白的mAb.与32株AIV H9亚型国内分离株进行血凝抑制试验表明,2H1 mAb具有良好的广谱性.本文成功地制备了抗AIV H9亚型血凝素蛋白的mAb,为AIV的抗原性分析、血清学诊断、疫苗质量的监测及流行病学调查等奠定了基础.
37.抗原基因密码子的优化增强H5亚型禽流感DNA疫苗免疫保护效果
- 姜永萍;张洪波;李呈军;张芳芳;朱启运;邓国华;包红梅;于康震;陈化兰
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：免疫原基因的密码子优化是提高DNA疫苗免疫保护效果的有效策略.鸡与哺乳动物细胞在蛋白翻译过程中具有相同的密码子编嗜性,但与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异.为此,利用寡核苷酸合成、重叠延伸PCR法及限制酶切法构建了密码子优化的A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因(optiHA),并将其插入CMV启动子表达载体pCI构建了H5亚型DNA疫苗质粒pCIoptiHA.DNA疫苗质粒pCIHA和pCIoptiHA分别围染293T细胞,间接免疫荧光检测转染后24-48小时293T细胞中瞬时表达的HA抗原蛋白,结果密码子优化的HA基因表达水平显著高于野生型HA基因.为进一步评估HA基因密码子优化对H5亚型禽流感DNA疫苗免疫效果的影响,表达野生型HA基因的DNA疫苗质粒pCIHA及pCIoptiHA分析以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后分别用100LD<,50>的HPAIV A/Chicken/LN/45/01(H5N1)[LN/45/01(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5、7采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化.结果,100μg pCIoptiHA可形成75﹪的免疫保护,100μg pCIHA可形成50﹪的免疫保护;10μg pCIoptiHA可形成对免疫鸡75﹪的部分免疫保护,而10μg pCIHA则基本不能形成免疫保护;pCIoptiHA诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA.试验结果表明,HA基因密码子的优化可显著提高H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果.
38.口蹄疫复合多表位二价DNA疫苗的构建及其免疫原性疫研究
- 尹革芬;金宁一;葛淑敏;郑敏;马鸣潇;张洪勇;秦晓冰;李萍
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：基于目前FMD疫苗研究的现状及发展趋势,在详尽了解口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth disease virus,FMDV)分子结构及其生物功能,分析病毒抑制宿主免疫应答的分子成分,及激活宿主免疫细胞产生保护性免疫应答(中和抗体和CTL)的分子基础上,本研究提出以O型和A型FMDV主要结构蛋白VP1基因为基础,以非结构蛋白3ABC及结构蛋白VP4上的Th2细胞表位为辅助基因,将以上三个基因串联,组装FMDV主要流行毒株O型和A型二价复合多表位基因OAT;随后,以真核表达质粒pVAX1为载体,以复合多表位基因OAT为目的基因构建核酸疫苗表达质粒pVAX1-OAT,作为口蹄新型疫苗的候选疫苗,为有效控制FMD的流行奠定基础.
39.口蹄疫基因工程疫苗在牛的试验免疫研究
- 郑敏;金宁一;秦晓冰;金扩世;尹革芬;田明尧;郭建顺;徐敬龙;李昌;夏志平
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本课题组经过多年努力,先后成功构建并筛选出两代共表达FMD保护性抗原基因以及细胞因子的重组鸡痘病毒活载体疫苗以及重组DNA疫苗.上述疫苗经小鼠试验免疫,表明均具有良好的免疫原性,可以引起针对FMDV高水平的特异性体液和细胞免疫应答.据此,本研究利用上述重组疫苗免疫牛,并对其诱导的特异性体液和细胞免疫水平进行了检测,以此确定最佳疫苗和免疫策略,为下一步即将进行的攻毒保护试验提供必要的基础数据.
40.口蹄疫诊断方法研究进展
- 鲁会军;韩松;金宁一
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：口蹄疫病毒共有7种血清型:O,A,C,Asial,SAT1,SAT2和SAT3以及更多的亚型.该病传播途径多、传染性强、为多种动物共患,严重危害家畜的生产力和畜产品质量,给畜牧业和进出口贸易造成较大的经济损失,直接威胁着国际贸易和国家声誉及人类食品卫生,因而受到人们的普遍关注.控制口蹄疫关键在于早发现、早隔离、早预防.因而快速、敏感、可靠的诊断方法受到人们的重视,现将口蹄疫诊断技术予以概述.
41.快速乳胶凝集试验检测禽流感病毒亚型H5N1血清抗体的研究
- 徐晓娟;金梅林;喻正军;李红超;邱德新;陈焕春
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：快速的检测禽流感亚型H5N1血清抗体的乳胶凝集试验被建立和评价.9-11日龄的SPF(special pathogen free)鸡胚增殖的禽流感病毒(Aian Influence Virus,AIV)灭活后,用超速离心的方法对其进行纯化.提纯的病毒倍比稀释后致敏乳胶与标准阳性血清进行反应,选择最佳的抗原致敏浓度用在最佳条件下致敏的乳胶和血凝抑制试验检测鸡血清830份.结果表明,相对于血凝抑制试验,乳胶凝集试验的敏感性是88.8﹪,特异性是97.6﹪,与血凝抑制试验的符合率达到89.6﹪.进一步的试验说明了该方法有很好的特异性和重复性.该研究结果表明乳胶凝集试验可以用于禽流感亚型H5N1的的诊断、抗体监测和流行病学调查.
42.狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组犬-2型腺病毒构建及免疫研究
- 王永志;扈荣良;王莘;张守峰;李海涛;肖跃强;夏咸柱
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：通过RT-PCR扩增得到狂犬病病毒糖蛋白膜外区序列,将该序列克隆入pMD-18T中;用膜外区序列将pEGFP-C1中的绿色荧光蛋白部分取代,得到含有表达盒的pEGFP-G<,2>,用AseI和MluI双酶切可游离出此表达盒,在此表达盒中启动子是CMV,终止信号是SV40 polyA;将此表达盒放入含CAV-2 E3区的载体中,并将E3区作部分缺失;把重组后的E3区放回含CAV-2全基因组的质粒中,游离重组的基因组后转染MDCK细胞,包装出表达盒正、反向插入E3区的重组犬-2型腺病毒;将两株重组腺病毒免疫幼犬,在幼犬体内产生了针对狂犬病病毒的抗体.
43.狂犬病病毒糖蛋白重组犬2型腺病毒的构建
- 张守峰;扈荣良;肖跃强;田向阳;夏咸柱
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本试验以犬2型腺病毒全基因组重组质粒pPolyⅡ-CAV-2及其E3区重组质粒pVAX-E3为基础,通过Dra Ⅲ和Ssp Ⅰ双酶切,缺失25097bp-26141bp共1044bpE3区片段,按与编码链相同转录方向插入由CMV启动子、狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因、SV40 polyA构成的总长2424bp的表达盒,获得重组基因组质粒pPoly Ⅱ-CAV-2-CGS(34.7kb).以Asc Ⅰ和Cla Ⅰ双酶切,游离重组基因组(32.7kb),在脂质体Li0pofectamine 2000介导下,转染MDCK细胞系,获得了E3区携带狂犬病病毒糖蛋白表达盒的重组犬2型腺病毒CAV-2-CGS.Western印迹试验表明,CAV-2-CGS表达了狂犬病病毒糖蛋白.初步接种试验显示,重组病毒可以诱导犬产生狂犬病病毒特异性抗体.
44.狂犬病鼠源野毒M株核蛋白基因cDNA的克隆及序列分析
- 钱爱东;李公美;赵云胶
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：从感染狂犬病的鼠脑中快速提取病毒RNA,用RT-PCR得到编码核蛋白完整结构基因的cDNA,进一步将此基因克隆入pGEM-T中,进行核苷酸序列的测定,并推导出氨基酸序列,将这一序列与国内外已发表的9株狂犬病病毒的NP全基因进行比较分析,结果表明M株与上述9株的同源性在71.0﹪~99.8﹪之间,氨基酸同源性在77.6﹪~99.6﹪之间,M株与CVS株无论核苷酸还是氨基酸同源性都最高为99.8﹪和99.6﹪.而与CTN的核苷酸序列同源性较低,与Mokola株无论核苷酸还是氨基酸同源性都最低分别为71.0﹪和77.6﹪,本研究对于进行狂犬病病毒的分子流行病学调查和研制狂犬病基因工程苗具有重要意义.
45.李斯特菌溶血素基因的原核表达及其生物学特性
- 殷月兰;焦新安;潘志明;张晓明;顾志强
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：李斯特菌血素(LLO)是产单核细胞李斯特菌的主要毒力因子,利用PCR技术从血清型4b的产单核细胞李斯特菌菌株中扩增出编码LLO的hly基因,经克隆筛选和测序鉴定后,构建成该基因的原核表达载体pGEX6P-1-hly,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳结果表明:LLO与谷胱甘肽GST在大肠杆菌中已融合表达,融合蛋白的分子量为82KD;溶血实验证明融合蛋白具有较强的裂解真核细胞膜的作用,表明LLO具有生物活性,其溶血效价达2.26×10<'4>HU/mg.
46.两种PrP截短型多肽的神经毒性的研究进展
- 袁志栋;王志亮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：PrP106-126和PrP118-135分别对应于人PrP<'c>序列106-126和118-135残基,两个肽段在实验中具备PrP<'c>异常异构体PrP<'sc>的部分病理特症,因此PrP106-126和PrP118-135就成为了研究PrP<'sc>神经细胞毒性致病机理的合适的模型.
47.裂谷热的流行传播、控制及其风险分析
- 李林;王志亮;陈继明;魏荣
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：我国有可能传入PVFV,而且具备该病进一步流行所需要的条件,因此必须严格检疫,防止该病以任何途径传入;长期控制媒介蚊子密度,使之低于爆发的水平;加强检测工作,及时发现调查可疑病例;建立快速准确可靠检测技术储备,以便快速准确地对该病做出诊断.在阿拉伯半岛流行的裂谷热已经警告人们,只要条件适当,裂谷热病毒传入新的地区就有可能引起在动物、人间的流行,甚至可能定植下来很难被清除,而且裂谷热很可能像登革热一样成为世界性的公共卫生问题.
48.曼那角病毒病
- 查红波;刘尚高
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：染猪只直接接触的30多个人中,只有两个人被感染.这两个被感染者表现出严重的发热、起皮疹,身体变得极其衰弱.人被曼那角病毒感染可能是由于人的伤口或眼结膜直接接触含有曼那角病毒粒子的体液或其它组织所致.最近几十年来,由果蝠传染给家畜和人的病毒越来越多.这可能与果蝠栖息地受到破坏有关.
49.南京市5家农贸市场所售鸡只新城疫(ND)、禽流感(AIH<,5>)二种疫病免疫抗体监测
- 陈昌海;张月锋;程雷;郝桂兰
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验对南京市5家农贸市场50份鸡血清样品进行了新城疫(ND)、禽流感(H<,5>型)抗体测定,结果ND抗体小于2<'5>的有36份,占72﹪,大于2<'5>的有14份,占28﹪;禽流感H<,5>抗体小于2<'4>的有18份,占36﹪,大于2<'4>的有32份,占64﹪.检测结果表明所采5家农贸市场50份鸡只ND和AI H<,5>抗体水平均比较低,潜在着感染这两种疫病的可能,需加强市场监测和产地检疫,加强免疫,以减少这两种疾病的发生.
50.尼帕病毒的研究进展
- 刘晔;丁壮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：科学家们对Nipah病毒已有初步认识,对其流行病学尚在进一步研究之中,这种病毒在其他野生动物中是否还有宿主,兽医界正在研究其传播的范围并准备开发Nipah病毒的相关疫苗.
51.牛分枝杆菌MPB70基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
- 姜秀云;王春凤;王春芳;何昭阳
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究以牛分枝杆菌Valleelll染色体DNA为模板,以MPB70成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,获得约500bp的DNA片段.通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T Vector中,成功地构建出克隆载体pGEM-T-70.以BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切pGEM-T-70和pET28a(+),并将纯化的MPB70基因亚克隆至pET28a(+)中,构建出原核表达载体pET28a-70.将pET28a-70转化至感受态E.Coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约25kDa外源蛋白带.Western blot分析发现,该蛋白具有牛分枝杆菌抗原性,从而为进一步研究MPB70的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定基础.
52.牛结核病
- 刘思国;宫强;王牟平;王春来;彭永刚
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：牛结核病是由牛分枝杆菌和结核分枝杆菌所引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病,可通过病畜传染给人类或其他动物.牛结核病在世界各国均有发生,在我国依然是最常见的多发性疾病.牛结核病的传染流行严重地影响到畜牧业的持续健康发展,更严重威胁着人类的身心健康.在那些还流行牛结核病的国家中,人类始终受到该病的威胁,除非消灭牛结核病,否则人类结核病的控制是不会成功的.因此,要从根本上控制牛结核病的发生与流行,必须加强对本病的诊断学和综合防治措施的研究,从而为控制和消灭牛结核病提供技术支持.
53.禽流感病毒分离株A/Chicken/Jilin/9/2004(H5N1)基因组全长序列测定和各基因的遗传分析
- 贾雷立;金宁一;金扩世;夏志平;金洪涛;李昌;郑敏;连海;郭建顺
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究对1株H5N1亚型禽流感病毒(AIV)Chicken/Jilin/9/(H5N1)(JL9/04)进行了全病毒基因组序列测定和分析.结果表明,所扩增到的8个片段均包括相应的病毒基因的完整开放阅读框架.通过序列分析,就整体而言,JL9/94株与广东分离株A/chicken/Guangdong/174/04(H5N1)(GD4/04)及香港分离株A/Goose/Hong Kong/3014.8/2000(HTN1)(HK8/00)的同源性较高;而与广东分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)(GD1/96)及香港分离株A/Hong Kong/156/97(HK156.07)的同源性较低.JL9/04株与其余各株HA的核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性差异均较小(97.2﹪~98.8﹪,96.3﹪~98.4﹪).JL9/04株在HA切割位点处的6个连续碱性氨基酸残基序列为RRRKKR↓GLF,符合AIV强毒株HA基因裂解位点的分子模式.JL9/04株在HA上的6个糖基化位点、2个受体结合位点与参照毒株完全一致,表明这几个毒株HA基因亲缘关系极为密切,且具有相似的生物学特性.JL9/04株与欧亚种系代表株A/Turkey/Ireland/1378/83(Ire/83)的HA同源率为86.9﹪,而与北美种系代表株A/chicken/Penn/1/83(PA/83)同源率仅为77.4﹪,表明该毒株起源于欧亚种系.就NA而言,JL9/04株与GD4/04株的同源性最高(97.9﹪,98.9﹪),与HK156/97株的同源性最低(87.1﹪,90.7﹪).香港流感病毒分离株HK156/97的NA缺失57个核苷酸(19个氨基酸)残基,而JL9/04株、GD4/04株以及泰国分离株TL/04的NA均缺失60个核苷酸(20个氨基酸)残基,缺失位置与HK156/97株相比较向5′端移动了5个氨基酸残基.
54.禽流感病毒核蛋白单克隆抗体的研制及其初步应用
- 吴晓东;陈义平;宋翠平;王志亮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：差速离心法纯化H5亚型禽流感病毒,经0.1﹪甲醛灭活后,免疫8周龄Balb/c小鼠,取其脾脏与骨髓病细胞SP2/0融合,以杆状病毒表达的禽流感核蛋白、H5亚型禽流感病毒为包被抗原的间接ELISA试验筛选出2株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株3C10、6F5,免疫印迹试验表明,两株单抗均可特异识别H5、H9亚型禽流感病毒约为60KD的核蛋白.两株单抗的间接免疫荧光试验显示:感染重组杆状病毒的Sf9细胞的胞浆及胞膜区呈特异性绿色荧光,而感染野生型杆状病毒的Sf9细胞未呈现任何特异性荧光.利用本中心生产的禽流感病毒浓缩抗原、重组核蛋白抗原与两株单抗的腹水进行琼扩试验,3C10、6F5腹水的琼扩效价分别为2<'9>、2<'8>,我们所研制的禽流感核蛋白单抗将用于禽流感的快速检测.
55.禽流感病毒核蛋白基因在杆状病毒表达系统中的表达及其鉴定
- 陈义平;王志亮;刘佩兰;吴晓东;宋翠平
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：用RT-PCR扩增出禽流感病毒A/chicken/Jiangsu/08/02(H9N2)株核蛋白(NP)基因,首先克隆到pGEM-T easy载体,再亚克隆到转座载体pFastBacl,最后将含有禽流感病毒核蛋白基因的表达盒转座到穿梭载体Bacmid中.重组质粒转染Sf9细胞,获得了重组杆状病毒reBac-N,经扩增后重组杆状病毒的滴度达到5×10<'8>pfu/ml,以10个MOI的reBac-N感染Sf9细胞,经SDS-PAGE、Western blot和琼脂扩散(AGID)试验,结果可见核蛋白以非分泌、可溶性方式表达,且感染后72小时表达量最高,分子量约56kDa,与天然核蛋白大小一致.琼脂扩散试验还表明,重组核蛋白具有良好的抗原性,且高度特异,可取代常规全病毒琼扩抗原,用于禽流感抗体检测.
56.禽流感病毒检测方法研究进展
- 费东亮;金宁一
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：由于世界各地禽流感的暴发频率越来越高、流行面积越来越广,因而导致全球对它的高度关注,虽然各国对禽流感防止策略不尽相同,但都把禽流感的快速诊断和及时监测作为首要步骤.在国际贸易中,对AIV的检疫也成为各国进出口贸易的重点检测对象.AIV检测方法包括传统AIV检测方法和分子生物学检测方法.
57.禽流感病毒血凝素基因核酸疫苗的构建与鉴定
- 王凯;金宁一;夏志平;徐一鸣;胡仲明
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：将重组质粒pUCm-H5HA、pMD18-H7HA、pMD18-H9HA上的禽流感病毒血凝素H5HA、H7HA、H9HA基因分别插入到核酸疫苗质粒pVAX1中,构建成核酸疫苗表达质粒pVAXH5HA、pVAXH7HA和pVAXH9HA.经酶切鉴定正确后用脂质体法转染BHK细胞,通过免疫荧光试验,结果在细胞膜和细胞浆中观察到了特异性的黄绿色荧光,证明表达产物具有特异性.
58.人血清犬埃立克体抗体ELISA检测方法的建立
- 刘世中
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：目的:建立一种简要、快捷德诊断人血清中犬埃立克体抗体水平德方法.方法:用人工感染犬埃立克体的实验犬血清,提取IgG后免疫实验动物制备出抗体,并建立了ELISA检测法.结果:兔抗犬埃立克体抗体与羊抗体IgG—HRP有明显交叉反应;鸡抗犬埃立克体抗体与羊抗体IgG—HRP没有交叉反应.结论:用犬埃克体抗独特型抗体进行人血清犬埃立克体抗体水平调查是可行的.
59.日本脑炎病毒E蛋白主要抗原域的原核表达与间接ELISA检测方法的初步建立
- 杨耀武;郑其升;张晓勇;周斌;曹瑞兵;陈德胜;陈溥言
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：重组质粒pET-E转化宿主菌BL21,经1.0mmol/L IPTG诱导,外源基因以包含体的形式获得高效表达.通过Western blotting检测证明表达产物具有良好的抗原性.以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测JEV抗体的间接ELISA方法.结果表明,抗原的最佳稀释度为1:2000,血清的最佳稀释度为1:200,阳性标准初步定为:OD<,待检血清1.2,且OD<,待检血清>/OD<,阴性血清2.
60.日本脑炎病毒SA14-14-2株E基因抗原域Ⅲ的克隆及高效表达
- 郑其升;杨松;徐学清;张晓勇;曹瑞兵;陈德胜;陈溥言
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：根据GenBank公布的Japanese Encephalitis Virus(JEV)SA14-14-2减毒株的核苷酸序列(GenBank登录号:AF315119),设计并合成一对特异性引物.应用RT-PCR方法扩增出编码JEV囊膜蛋白抗原域Ⅲ的基因(Em),将其克隆入pMD18-T载体,经测序后克隆入原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-Em.阳性质粒转化BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导,JEV-Em基因获得表达,经细胞定位分析,目的蛋白以包含体的形式存在于大肠杆菌中.通过改变IPTG的浓度和诱导时间,确定了表达Em蛋白的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.1mmol L<'-1>,诱导时间为3h,在大肠杆菌中的最高表达量为54.9﹪.Western blot分析表明表达产物具有良好的免疫学活性.利用纯化的表达产物作抗原包被酶标板,可以明显的区分JEV阴阳性血清,并且不与PRV、CSFV、PRRSV、PPV、PCV的阳性血清发生反应,结论:重组JEV Em蛋白可以用于检测猪血清中JEV抗体水平.
61.肉种鸡禽流感疫苗接种后雏鸡母源抗体水平的检测
- 成进;王延;沙依兰古丽;薛英;雷程红;刘宏杰;田华
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：对新疆某现代化的肉种鸡场的一群AA肉种鸡,在26周龄时接种禽流感H5亚型和H9亚型的双价灭活油乳剂疫苗,接种疫苗一个月后对孵化的商品代雏鸡进行了母源抗体检测,结果证明,禽流感H5亚型的母源抗体持续期约为37天,H9亚型的约为15天.H5抗体持续期明显长于H9,接种疫苗后,H5血清型的免疫效果明显高于H9.
62.朊病毒病的发生及生态学意义
- 郑艳军;丁壮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：朊病毒疾病是人和动物中的一种传染性、散发性和遗传性的神经退行性脑病.研究表明该病是由一种正常蛋白PrP的不正常折叠形式在大脑中积聚所致.本文重点从病原入手,阐述朊病毒病病原的结构、生理功能、理化特性、感染机制以及由prion的发现产生的生态学意义.
63.沙门氏菌对四环素的耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析
- 代敏;王红宁;吴琦;李春;于新芬
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究对16株猪致病性沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100﹪.对其四环素耐药基因tetC进行PCR扩增,结果在12株沙门氏菌的质粒上扩增出特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75﹪,具有较高的检出率;序列分析结果表明tetC的核苷酸同源率较高,达97.7﹪~98.7﹪,建立tetC基因的PCR检测技术,为沙门氏菌对四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的方法.
64.山羊白细胞介素18基因的克隆和体内外表达研究
- 刘文强;高运东;仲跻峰;赵宏坤
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：应用RT-PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的山羊脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码山羊白细胞介素(IL-)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480bp.序列分析表明gIL-18与奶牛和绵羊的IL-18基因序列高度同源.将gIL-18克隆到pET-32a(+)质粒载体中,转化大肠杆菌BL21后,IPTG诱导后经SDS-PAGE分析,得到了分子量为38kD的融合蛋白.使用半定量RT-PCR对山羊IL-18 mRNA的体内表达进行了测定,发现山羊巨噬细胞可以持续的表达IL-18 mRNA,不论是否加入刺激剂,而被LPS活化的PBMC只是微弱的表达IL-18 mRNA,肝脏和脾脏细胞经LPS活化后也可以检测到IL-18 mRNA的表达,其水平明显高于PBMCs.不同细胞中表达情况的差异可能反映了其产生成熟IL-18的能力.
65.实时荧光定量PCR技术研究与应用进展
- 花群义;金宁一
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,目前已得到广泛应用.所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法.
66.实时荧光定量TaqMan RT-PCR检测口蹄疫病毒
- 花群义;金宁一;徐自忠;杨云庆;董俊;周晓黎;杨晶焰;贾建军
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的野生、家畜偶蹄动物的一种高度传染性的疾病.快速和可靠的诊断对于FMD的控制至关重要,为采取有效措施,实验室诊断必须在24小时之内作出快速、准确的结论.动物和肉类产品带毒引发口蹄疫是多次大流行的主要原因.对肉食品中低含量的FMD病毒、隐性感染或持续带毒宿主进行准确检测的方法必须具备高敏感性、高特异性.常规的诊断方法如病毒分离、血清学试验、动物试验等,或费时费力,或特异性和敏感性不高,不能满足快速、准确诊断的要求.RT-PCR、竞争PCR和ELISA-PCR方法克服了这些方法的不足,可用于FMD的诊断,但也有费时、易污染、扩增后需电泳检测和每次检测的样品数量少等缺点.近几年发展起来的实时荧光定量RT-PCR将PCR与荧光检测相结合,克服了这些缺点,可对样品中的FMDV进行准确的定性和定量检测,具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、特异性强、重复性好等优点,已成为病原体检测的重要方法.本实验应用实时TaqMan RT-PCR对FMDV进行了定性和定量检测研究.
67.树突状细胞在沙门氏菌感染获得性免疫中的作用
- 潘志明;焦新安;黄金林;唐丽华;刘秀梵
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：对于沙门氏菌感染的免疫反应是天然免疫系统和获得性免疫系统共同发挥作用的结果.天然免疫系统中的许多成分以协调的方式来防御沙门氏菌的感染.其中发挥作用的细胞有吞噬性和非吞噬性的两种细胞组分,如中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞(NK)和NKT细胞等.这些细胞通过吞噬并杀死感染的细菌.最先是由中性粒细胞和巨噬细胞(MΦ)发挥这一功能.另外,这些细胞分泌产生的细胞因子和趋化因子也发挥重要作用,这些可溶性介质可以调控免疫应答并招募其它类型的细胞来帮助抵抗感染.
68.特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性检测二联重组鸡痘活疫苗细胞免疫水平
- 秦晓冰;金宁一
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究通过基因工程的方法将获得的O型口蹄疫病毒和2型猪圆环病毒二联重组鸡痘活疫苗vPUTALP1-ORF20RF1免疫本体动物猪,在二免后一周、二周、三周分别采猪血,用外周血淋巴细胞分离液从中得到淋巴细胞作为效应细胞,用质粒pDISPLAY-ORF2,pDISPLAY-Vp1分别转染PK15细胞,用G418筛选得到靶细胞.借助CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay试剂盒以其从细胞免疫水平评价重组鸡痘活疫苗的质量.
69.我国动物布鲁氏菌病疫情现状及防治对策
- 王兴龙;崔丽瑾
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：防治布病必须从控制和清除传染源、切断传播途径、保护畜群和易感危险人群的基本防治措施入手,应用有效的诊断措施揭露患病个体,对传播布病的有关重要因素加强管理,如对皮、毛和乳、肉食品等应加强监督管理,对屠宰场、牲畜交易市场、产地、运输渠道,尤其是对分散个体的营业者更应加强检疫和监督,加强未达标地区的基础免疫,强化种公畜检疫和病畜淘汰制度,同时加强布病监测和检疫工作,掌握疫情动态.
70.抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
- 胡茂志;焦新安;潘志明;黄金林;邵国青;刘秀梵
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀.可溶性表达产物亲和层析纯化后用于检测;同时,用GST-P36包涵体沉淀腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只).利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了一株能分泌特异性抗体的单克隆细胞株5A7-2.生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1:2.5×10<'6>;免疫球蛋白亚类为IgG<,2a>.免疫印迹结果显示,腹水单抗与GST-P36融合蛋白反应而不与GST蛋白反应,并且在猪肺炎支原体(Mhp)蛋白36 kD位置也有明显的条带,说明细胞株5A7-2所分泌的是针对Mhp P36蛋白的单抗.P36蛋白携带Mhp种特异性抗原表位,并且重组P36蛋白的抗体也不与其它支原体或细菌反应,因此,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础.
71.西尼罗病毒的病原学
- 魏荣;王志亮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：西尼罗河病毒分类上属于黄病毒科.在黄病毒科中,本病毒与日本脑炎病毒、墨累河谷脑炎病毒和圣·路易斯脑炎病毒同属于抗原性密切相关的一个病毒群.其所引发的疾病为西尼罗河病毒病,包括西尼罗河热和西尼罗河病毒性脑膜炎脑炎.
72.可传递性海绵状脑病
- 袁志栋;王志亮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：可传递性海棉状脑病是动物与人的一类慢性、致死性中枢神经系统疾病.由于该病病原——朊病毒蛋白,是肌体一种正常蛋白的异构体,故感染后宿主并不呈现明显的免疫应答反应.本文就当今已发现的动物和人的主要TSE做一简述,力图展示这组疾病的主要特点,以利于该病的控制和防范.
73.口蹄疫病毒3ABC基因截短体在毕赤酵母中的表达及鉴定
- 郑敏;金宁一;鲁会军;夏志平;马鸣潇;葛淑敏
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：口蹄疫(Foot-and-Mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth disease virus,FMDV)引起偶蹄动物的最烈性传染病之一.为了提高检测方法的特异性,Shen等利用合成的一系列短肽进行筛选,从2C、3ABC鉴定出12个可以诱导产生抗体的肽段,同时这些肽段主要集中在3A基因第70~140位氨基酸和3B基因第1~60位氨基酸的两个区域,表明上述区域是研制检测抗原的候选基因.毕赤酵母表达系统是当前成熟的真核表达系统之一,具有表达量高、稳定性好、便于高密度发酵、适度糖基化以及表达产物生物活性好等优点,在基因工程疫苗及药物的研制中显示出其特有的优越性.本研究探讨了FMDV 3ABC基因截短体在毕赤酵母表达系统中分泌表达的可行性,从而为研制FMD鉴别诊断试剂盒奠定了基础.
74.口蹄疫病毒3AB基因在重组杆状病毒中的表达及检测
- 鲁会军;韩松;郑敏;贾雷立;王凯;金宁一
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究利用杆状病毒表达系统实现了口蹄疫病毒3AB基因在昆虫细胞中的表达.首先克隆了3AB基因片段,将pMD18-3AB质粒及杆状病毒转座载体质粒pFatBac Ⅰ分别用EcoR Ⅰ及XbA Ⅰ酶切后,用T<,4>DNA连接酶连接,构建了重组质粒pFastBac-3AB;再将该重组质粒转化DH10 Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-3AB;将Bacmid-3AB转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒,并进行表达水平的检测.经SDS-PAGE和Western-blotting检测,结果表明,3AB蛋白在重组杆状病毒中获得表达.
75.口蹄疫病毒P1全长基因表达载体的构建及对马铃薯的转化
- 李昌;金宁一;王罡;王萍;张洪勇;郑敏;季静;尹革芬;余云舟
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：口蹄疫是目前危害家畜较为严重的传染病之一,FMDV是引起口蹄疫的病原,其结构蛋白P1成熟后裂解为VP1、VP2、VP3、VP4,包含了病毒的主要抗原位点,能诱导机体产生抗FMDV的体液和细胞免疫.过去,曾报道过VP1基因在植物中的表达,但将P1全长基因转入植物中尚未见报道.本研究将本室自主克隆的FMDV P1全长基因构建到植物表达载体pBI131上,通过农杆菌介导法转入马铃薯,经PCR及Southern杂交等方法,证明了P1基因已整合到马铃薯染色体基因组中.这是国内外将FMDV P1全长基因转到马铃薯中的首次报道,为进一步利用转基因植物生产FMD疫苗和研制开发新型基因工程疫苗奠定了基础.
76.鸭大肠杆菌性脑炎的研究
- 王永坤;钱钟;田慧芳
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本病是近几年来在雏鸭群和仔鸭群发生的一种传染病,经鸭胚和鸡胚分离及盲传3代及检测,均未能证明由病毒所致.而从脑组织及肝脏病料均分离到大肠杆菌,经血清型鉴定,O<,78>血清型占81.33﹪,O<,107>血清型占9.33﹪.表明从脑组织分离到O<,78>和O<,107>2个大肠杆菌血清型是致雏鸭和仔鸭脑炎的病原.
77.口蹄疫病毒聚合酶3D基因核酸疫苗质粒的构建与表达
- 鲁会军;韩松;郑敏;贾雷立;王凯;李昌;金宁一
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：根据中国口蹄疫流行毒株设计一对包含3D基因完整编码区的特异性引物,扩增出3D基因1410bp的特异带,并将纯化的扩增产物克隆到pMD18-T载体上.再用设计的酶切位点将3D基因连接到真核表达载体pCDNA3.1上,构建了重组质粒p CDNA3.1-3D.再将该质粒转染BHK-21细胞,转染的细胞培养物经Western blot检测表明,3D基因在BHK-21细胞中获得了表达.
78.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅱ基因的表达及其免疫原性研究
- 王芳;何孔旺;彭小华;邱索平;倪艳秀;张雪寒;郭容利;俞正玉
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究通过分子生物学技术从App血清5型中扩增了apxⅡA基因并克隆到大肠杆菌中,经诱导大肠杆菌高效表达了这种毒素,经动物保护性实验证明,此蛋白具有较高的免疫原性,这在研制猪传染性胸膜肺炎新型疫苗和建立有效的诊断方法等方面具有较高的学术价值和应用前景.
79.鸭源H9亚型禽流感病毒的分离及其生物学特性的研究
- 张敬峰;李银;刘宇卓;杨秀华;魏雪涛;王磊
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：禽流感(Avianinfluenza,AI)是由正粘病毒科A型流感病毒(AIV)引起的禽类疾病,曾在许多国家和地区流行,已成为世界性传染病,导致了巨大的经济损失,严重危害养殖业的发展甚至人类健康.为此,本实验室对AIV在鸭中的流行状况做了初步探索,并对分离到的AIV的生物学特性进行了研究.
80.猪肺炎支原体单克隆抗体的制备与鉴定
- 胡茂志;焦新安;潘志明;黄金林;刘秀梵
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：用KM2培养基(含马血清)培养猪肺炎支原体(Mhp)ZCF23株.高速离心收获培养物并用PBS悬浮,经反复冻融裂解后作为免疫原,腹腔注射免疫BALB/c小鼠.利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了5株分泌特异性抗体的单克隆细胞株,分别命名为:11C6、14C11、11B6-1、10C11-2和12E7-1.生物学特性鉴定表明,五株腹水单抗的间接ELISA效价均在1:10000左右;免疫球蛋白亚类均为IgG<,3>.免疫印迹结果表明,五株单抗所针对的抗原表位在90kD、40kD、70kD和60kD左右,而且不与马血清蛋白反应,说明以上单抗均是针对Mhp蛋白的特异性单克隆抗体.
81.乙型脑炎的流行现状和防制对策
- 陈征;罗满林
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：在我国乙脑发病具有明显的季节性,自20世纪70年代后期广泛开展乙脑疫苗预防接种以来,我国乙脑发病得到了有效的控制,但仍有局部暴发和流行.JEV人畜共患的自然特性意味着几乎不可能在全球范围内将它消灭,防制本病必须从流行病学方面进一步研究引起该病散播的病原生态学因素,研究病原和宿主及环境之间的相互作用.
82.应用多重PCR方法鉴定粪样和食品中产气荚膜梭菌
- 梁光军;赵李祥;杨旭芹;贾红;张小荣;文其乙;刘秀梵
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：按国标方法从346份粪便样品分离出了69株产气荚膜梭菌,从275份食品样品分离到97株产气荚膜梭菌.经过生化试验鉴定和多重PCR方法鉴定,证实均为A型产气荚膜梭菌,携带β<,2>毒素的产气荚膜梭菌共为53株,另从检出了2株肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌.本实验初步摸清了我国的粪便中和食品中的产气荚膜梭菌的动态分布.并在食品中发现了导致人食物中毒的肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌,为分子流行病学研究提供了重要理论依据.
83.在原核细胞中高效表达大肠杆菌不耐热肠毒素受体结合亚单位
- 郭学军;张锦霞;祝令伟;齐;刘军;孙洋;冯书章
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：从含有LT全毒素基因操纵子的质粒EWD299中扩增出LT的B亚单位基因后定向克隆于原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyss,用IPTG诱导表达后,将全菌裂解,用SDS-PAGE和Western-blot检测重组菌中外源蛋白的表达情况.结果表明,在原核细胞中高效表达了LTB蛋白,表达的重组蛋白占菌体蛋白总量的38﹪.
84.中国尼帕病毒病风险分析与防控措施的研究
- 陈继明;王志亮;赵永刚;王君玮
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：由于孟加拉国尼帕病毒疫情,世界上许多国家和国际组织对尼帕病毒病重视程度越来越高.本文将分析中国发生尼帕病毒病的可能原因以及其危害程度,并据此拟定我国防控尼帕病毒病一些措施.
85.重组鸡痘病毒生物安全性评价的PCR方法的建立
- 郭建顺;金宁一;夏志平;金扩世;徐敬龙;贾雷立;王凯
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：根据已发表的鸡痘病毒(FPV)4b核心蛋白基因的核苷酸序列设计合成了2对引物,通过对影响PCR扩增因素的优化,2对引物在同一反应条件下,以抽提vFV282重组鸡痘疫苗毒DNA或直接用其毒液制备的模板均能分别扩增出预期的549、1 361bp的片段.特异性检测表明,2对引物对vFV 282重组鸡痘疫苗毒、FPV 102株、FPV 282E<,4>(北京)、FPV 282E<,4>(吉林)、及FPV临床分离株均能扩增出相应特异性片段,而用鸡马立克氏病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、羊痘病毒、鸡胚成纤维细胞(CEF)制备的模板分别进行PCR扩增却成阴性.敏感性检测表明,2对引物(p<,1,2>、g<1,2>)分别能检测到10<'-2>、10<'-3>fmol的FPV DNA和10<'0.5>、10<'-0.5>TCID<,50>的病毒.同时试验也对环境中重组鸡痘病毒的浓缩及PCR检测方法进行了探讨.以上结果表明,本试验所建立的rFPV PCR检测法具有较高的特异性和敏感性,模板制作简单,完全可用于rFPV和FPV的检测.
86.猪、鸡主要病原菌耐药性检测及控制技术研究进展
- 王红宁;刘书亮;黄勇;周生;吴琦;柳萍
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本文主要以"猪、鸡主要病原菌耐药性检测与安全高效新兽药研发"项目取得的研究成果为材料,综述了猪、鸡主要病原细菌耐药性检测及其控制技术的研究进展.
87.猪A组轮状病毒VP4全基因片断的克隆与序列分析
- 王春凤;于守平;高云航;姜秀云;刘尚高
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从猪A组轮状病毒的总RNA中扩增了2332bp的VP4全基因.通过T4 DNA连接酶将其直接连接于克隆质粒载体pGEM-T-easy中,转化至受体菌JM109中,质粒提取并通过酶切鉴定、PCR鉴定、序列测定,证明重组质粒中pT-PRV4中含有轮状病毒VP4基因片断.经核苷酸序列分析,表明克隆了轮状病毒的主要保护性抗原VP4全基因的抗原表位区.
88.猪链球菌2型及其毒力因子检测多重PCR的建立与应用
- 马清霞;何孔旺;陆承平
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：我国猪源链球菌的病原菌中主要有猪链球菌2型和马链球菌兽疫亚种.自1998年在江苏某地暴发了由SS2引起的猪链球菌病以来,国内对此病原的研究日益深入.SS2菌株的毒力与其毒力因子关系密切,因此对SS2的检测不仅要进行血清型定型,还应进行毒力因子的鉴定.本实验是在单PCR检测的基础上,建立现时鉴定SS2及其主要毒力因子EF与MRP的多重PCR,并通过优化反应条件和组分组装成快速检测试剂盒,以期用于SS2的流行病学调查和快速诊断.
89.猪链球菌病二价(2型+C群)灭活疫苗的研制
- 何孔旺;俞正玉;倪艳秀;何家惠;王继春;郭容利;张雪寒;吕立新;刘冬霞;周萍;侯继波
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：为了有效预防猪链球菌2型及C群马链球菌兽疫亚种所引起的猪链球菌病,我们选取多株猪链球菌2型和马链球菌兽疫亚种国内分离强毒株,研制了猪链球菌二价灭活苗.
90.猪水肿病CD18株溶血性大肠杆菌分离与鉴定
- 徐刚;罗满林
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：通过小白鼠生物过滤方法从重庆地区仔猪水肿病流行病例中分离到一株溶血性大肠杆菌,经毒力试验证明该菌对小白鼠LD<,50>小于3×10<'8>个/0.5mL,经0.2mg/mL硫酸多粘菌素B作用的细菌悬液,除菌过滤后能使小白鼠发生典型的后肢瘫痪等毒素后效应症状;分别用SLT-IIV/B引物(P1,P2)和fedA(P3,P4)引物以分离菌悬液为模板,能扩增出约200bp和500bp的特异核酸片断;经培养特性、生化试验以及因子血清检测,鉴定为O<,138>:K<,81>.
91.猪胸膜肺炎放线杆菌毒素IV基因体外表达与初步应用
- 彭小华;何孔旺;陆承平
- 《第六次人畜共患病学术交流会》 | 2004年
摘要：本研究应用分子生物学技术从App1、3型中扩增ApxⅣ的部分基因,并克隆到大肠杆菌中,经诱导体外高效表达了这种毒素,将表达产物作为抗原建立了间接ELISA,为App感染的血清学检测奠定了基础.