SIGNIFICACIÓN DE LOS HAPLOTIPOS DEL GEN BETA GLOBINA EN EL ORIGEN DE LAS HEMOGLOBINOPATÍAS EN VENEZUELA

摘要

In the present study, the significance of the beta globin gene haplotypes in the origin of the hemoglobinopathies was determined in 60 unrelated patients with Hb C and 66 patients with beta thalassemia. Quantitation of Hb A, Hb A_2 and Hb F was performed by ion exchange HPLC-CE. Genomic DNA was isolated from white blood cells by the salting-out procedure. Analysis of the β globin gene mutations was done by polymerase chain reaction (PCR) - based reverse dot blot (RDB) technique. The β globin gene cluster haplotype was characterized by a PCR-based restriction enzyme analysis (PCR-RFLP). The beta globin gene haplotype associated with Hb C was the β~(CI)(-+--+) in 65%, followed β~(CII) (----+) in 5% and β~(CIII) (-----) in 3.3%. The atypical haplotypes were 26.6%. Different haplotypes linked to the β thal-assaemia chromosomes were found and each mutation was associated to a few specific haplotypes. The chromosomes carrying CD 39 (C→T) mutation was associated to I and Ⅱ haplotypes. The IVSI-110 (G→A), del 1.39 Kb and -86 (C→G) mutations were associated to haplotype Ⅰ, the IVSI-5 (G→A) and IVSIII-745 (C→G) mutations to haplotype Ⅶ.%El presente estudio tiene por finalidad corroborar el origen de las variantes de hemoglobinas S, C y la beta talasemia en un grupo de pacientes venezolanos a través del estudio de los haplotipos del gen beta globina. A 60 pacientes no relacionados con Hb C y a 66 pacientes con beta talasemia se les determinó las variantes de hemoglobinas mediante la técnica de cromatografía líquida de alta precisión de intercambio catiónico (HPLC-CE). El ADN fue extraído por el método de salting out. El diagnóstico de las mutaciones beta talasémicas fue realizado por reverse dot blot y la determinación del haplotipo del gen beta globina por la técnica de los polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción (RFLP). El haplotipo del gen beta globina asociado a la Hb C fue el　β~(CI)(-+--+) en 65%, seguido del β~(CII)(----+) en 5% y el β~(CIII) (-----)en 3,3%. Se observo un 26,6% de haplotipos atípicos. En pacientes con beta talasemia la mutación CD 39 (C→T) estuvo asociada a los haplotipos I y Ⅱ, las mutaciones IVSI-110 (G→A), Del l,39kb y -86 (C→G) al haplotipo I, la mutación IVSI-5 (G→A) y la IVSII-745 (C→G) al haplotipo Ⅶ, la IVSI-1 (G→A) al haplotipo V, la IVSII-1 (G→A) al Ⅲ y la IVSI-6 (T→C) al Ⅵ, coincidiendo estos resultados con los de la literatura. En pacientes con Hb SC, el haplotipo β~s CAR fue el más frecuente, seguido del haplotipo Benin y Camerún. Los resultados sugieren que el origen de las hemoglobinopatías en Venezuela es mediterráneo y africano.