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Rapid characterization of the activities of lignin-modifying enzymes based on nanostructure-initiator mass spectrometry (NIMS)

机译:基于纳米结构引发剂质谱(NIMS)的木质素修饰酶活性的快速表征

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摘要

BackgroundProducing valuable fuels and chemicals from lignin is a key factor for making lignocellulosic biomass economically feasible; however, significant roadblocks exist due to our lack of detailed understanding of how lignin is enzymatically depolymerized and of the range of possible lignin fragments that can be produced. Development of suitable enzymatic assays for characterization of putative lignin active enzymes is an important step towards improving our understanding of the catalytic activities of relevant enzymes. Previously, we have successfully built an assay platform based on glycan substrates containing a charged perfluorinated tag and nanostructure-initiator mass spectrometry to study carbohydrate active enzymes, especially various glycosyl hydrolyses. Here, we extend this approach to develop a reliable and rapid assay to study lignin-modifying enzymes.
机译:背景技术从木质素生产有价值的燃料和化学品是使木质纤维素生物质在经济上可行的关键因素。然而,由于我们缺乏对木质素如何酶解的方式以及可能产生的木质素片段范围的详细了解,因此存在重大障碍。开发适用于表征推定的木质素活性酶的酶促测定方法是朝着增进我们对相关酶催化活性的理解迈出的重要一步。以前,我们已经成功地基于包含带电荷的全氟标签的聚糖底物和纳米结构引发剂质谱技术成功构建了一个检测平台,以研究碳水化合物活性酶,尤其是各种糖基水解酶。在这里,我们扩展了这种方法,以开发一种可靠,快速的方法来研究木质素修饰酶。

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