壳聚糖及聚乙烯亚胺携载 pGL3质粒转染细胞的毒性及效率实验研究

摘要

目的通过对阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)以及 PEI 联合壳聚糖介导 pGL3质粒细胞内转染的效率及细胞毒性的观察，为其进一步携载目的基因转染细胞做好前期铺垫工作。方法培养 HaCaT 及 HUVEC 细胞，同时制备壳聚糖-PEI600Da (CP)以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒，采用 MTT 法观察壳聚糖、PEI600Da、PEI25kDa、CP 以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒对上述细胞的毒性作用，采用虫荧光素酶检测法观察 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒的转染效率。结果 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒的细胞毒性明显低于 PEI25kDa/DNA 纳米粒的细胞毒性；CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒明显提高 DNA 转染 HaCaT、HUVEC 细胞的效率。结论 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒有效转染 HaCaT、HUVEC 细胞，且细胞毒性低；阳离子聚合物 CP、PEI600Da 作为转染基因转染的载体具有广阔的应用前景。