人参二醇通过调节PI3K/Akt/GSK3β信号通路诱导血小板聚集参与止血过程

摘要

目的目的研究人参二醇(PD)的止血作用并探讨其作用机制。方法在体内研究中,采用小鼠断尾和肝划痕方法,观察PD对小鼠断尾出血时间和肝划痕出血时间的影响,应用血常规分析仪检测血常规;在体外研究中,采用血凝分析仪检测凝血四项;应用血小板聚集仪检测血小板聚集度;应用流式细胞仪检测人洗涤血小板中P-选择素(CD62P)和糖蛋白IIb/IIIa(PAC-1)表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测人血小板的相关蛋白表达。结果与空白对照组比较,PD能明显降低小鼠断尾和肝划痕的出血时间;显著增加大鼠血浆中红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、血小板数量(PLT)、血小板压积(PCT)和大型血小板比率(P-LCR);PD能显著缩短大鼠血清的活化部分凝血活酶时间(APTT)和增加纤维蛋白原的含量(FIB);在血小板聚集的结果中,大鼠和人的血小板聚集率随着PD浓度的增加而显著增加,当PD浓度为140μM时,最大聚集率分别为51.40%和33.40%。PD激活血小板,促进CD62P的释放和增加糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的表达。同时,PD能显著增加磷酸肌醇3激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)、蛋白酶B(Protein Kinase B,Akt)和糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3 beta,GSK3β)磷酸化水平。结论PD具有止血作用,作用机制是通过激活内源性凝血途径和血小板的PI3K/Akt/GSK3β信号通路促进血小板聚集,形成血栓,参与止血过程。