独活寄生汤对膝骨关节炎模型大鼠NF-κB通路关键分子表达的影响

摘要

目的:探讨独活寄生汤对膝骨关节炎模型大鼠核因子κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)通路关键分子表达的影响。方法:将60只SPF级Wistar大鼠分为空白组(10只)和造模组(50只)。模型制备成功后按随机数字表法分为模型组,硫酸氨基葡萄糖组(阳性组),独活寄生汤高、中、低剂量组,共5组,每组10只。空白组及模型组大鼠给予生理盐水灌胃,阳性组及独活寄生汤各剂量组给予等体积药物灌胃,连续灌胃21天。观察各组大鼠一般生存状况,苏木精-伊红染色法观察各组大鼠软骨组织病理变化,酶联免疫吸附法检测大鼠血清白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的含量,荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测各组软骨组织IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α及NF-κB p65的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测各组软骨组织NF-κB p65及p-NF-κB p65的蛋白表达水平。结果:模型组大鼠精神萎靡,毛发凌乱,饮食饮水较少;独活寄生汤各剂量组和阳性组大鼠精神状态较好,毛发饮食等恢复正常,其中高剂量和阳性组恢复最好。空白组大鼠软骨组织细胞排列整齐,结构清晰,软骨基质着色均匀;模型组大鼠细胞排列紊乱,结构不清,表面粗糙;与模型组比较,阳性组和独活寄生汤各剂量组大鼠软骨组织结构较完整、清晰,表面较光滑,软骨基质着色较均匀。与空白组比较,模型组IL-4、IL-6及TNF-α血清中含量及软骨组织mRNA表达水平均升高,IL-10水平降低(P<0.05);与空白组比较,模型组软骨组织中NF-κB p65 mRNA及蛋白水平均升高(P<0.05);与模型组比较,独活寄生汤各剂量组、阳性组的血清的IL-4、IL-6、TNF-α含量及NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白水平均降低(P<0.05);与模型组比较,独活寄生汤中、高剂量组、阳性组IL-4、IL-6、TNF-α及NF-κB p65软骨组织mRNA水平均降低(P<0.05);血清IL-10含量、软骨组织mRNA水平升高(P<0.05)。结论:独活寄生汤可调控IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、NF-κB p65及p-NF-κB p65表达,可能是治疗膝骨关节炎的机制之一。