抗VEGF发卡状核酶抑制肝癌VEGF表达和移植瘤生长

摘要

目的:采用抗人血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）发卡状核酶基因转染肝癌细胞,观察核酶对VEGF表达及肿瘤生长的影响。方法:采用脂质体介导的方法,将人工合成的抗VEGF发卡状核酶基因转染肝癌细胞SMMC-7721,同时制备空载体和细胞对照,经G418筛选获得阳性克隆,基因组水平鉴定核酶在细胞中的表达,半定量RT-PCR法和免疫组化法观察核酶对SMMC-7721细胞VEGF表达的影响。接种各组细胞于裸鼠皮下,观察瘤体体积大小和质量,免疫组化法观测各组肿瘤微血管变化和VEGF的表达。结果:核酶基因成功导入到肿瘤细胞中,转基因细胞的增殖速率明显下降（P＜0.01）,转染核酶组细胞VEGF水平明显下降（P＜0.01）。移植瘤成瘤率和生长速度减慢（P＜0.01）,肿瘤组织VEGF表达和血管形成减少（P＜0.01）。结论:抗人VEGF发卡状核酶基因在体内、体外均可抑制肝癌VEGF表达,通过减少血管形成抑制肿瘤生长,为进一步开展肝癌血管靶向基因治疗提供实验依据。