抗人VEGF发卡状核酶基因的构建及其对肝癌细胞VEGF蛋白表达的影响

摘要

利用计算机辅助设计合成针对人VEGF的发卡状核酶(RZ),定向亚克隆于真核表达载体pcDNA3.1+中,转染肝癌细胞SMMC-7721,RT-PCR鉴定.ELISA法和MTT法检测SMMC-7721细胞对照组、SMMC-7721/pcDNA3.1+空载体对照组和SMMC-7721/RZ基因转染组细胞VEGF表达和增殖情况,流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡情况.结果为SMMC-7721/RZ基因转染组细胞VEGF表达水平和细胞增殖速率显著低于SMMC-7721细胞对照组和SMMC-7721/pcDNA3.1+空载体对照组.MC-7721/RZ基因转染组细胞出现凋亡峰,其凋亡率达11.0%,而细胞对照和空载体细胞对照均末出现.认为SMMC-7721/RZ转基因细胞株的成功构建和生物学特性的初步研究为进一步建立裸鼠人肝癌模型及评价RZ对体内肝癌生长的抑制作用奠定了一定的基础.