他莫昔芬通过GPR30介导CAF外分泌CXCL16促进乳腺癌MCF-7细胞迁移及侵袭

摘要

目的 :探讨他莫昔芬（tamoxifen,TAM）通过雌激素G蛋白偶联受体30（estrogen G-protein-coupled receptor 30,GPR30）介导肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated i broblast,CAF）外分泌CXC型趋化因子配体16（CXCchemokine ligand 16,CXCL16）对乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭的影响。方法 :TAM和TAM联合GPR30特异性抑制剂G15分别处理CAF后,通过基因芯片检测2组细胞差异表达的基因,并从中挑选出CXCL16,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法进行验证,应用ELISA法检测细胞上清液中CXCL16的浓度。用TAM和TAM联合G15处理后的CAF上清液、不做任何处理的CAF上清液、添加CXCL16或CXCL16中和抗体的培养液分别培养MCF-7细胞,采用MTT法、划痕愈合实验和Transwell小室法检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果 :与TAM联合G15处理组相比,TAM处理组CAF中2 358个基因表达上调,2 178个基因表达下调;TAM处理组CAF中CXCL16 m RNA和蛋白的表达水平及上清液中CXCL16的浓度均显著上调（P值均＜0.01）,且该效应可被G15阻断（P值均＜0.01）。TAM处理组CAF上清液和添加CXCL16培养液培养的MCF-7细胞,其迁移和侵袭能力均增强（P值均＜0.05）,而增殖能力则无显著变化（P值均＞0.05）。结论 :CAF经TAM处理后CXCL16分泌增多,该效应由GPR30介导,而外分泌的CXCL16可促进乳腺癌MCF-7细胞的迁移和侵袭能力。