人脐带源间充质干细胞体外成脂、成骨、成软骨诱导分化

摘要

目的 体外分离培养脐带来源间充质干细胞,确定其向脂肪、骨、软骨细胞的分化能力.方法 取新鲜的脐带组织,剔除脐动静脉,剩余部分剪成极为细小的组织块,0.2%Ⅱ型胶原酶37℃静止消化17 h,用含10%胎牛血清的达尔伯克改良伊格尔培养基/Ham's F12培养基终止消化,培养3 ~ 5 d后得到较为均一的贴壁细胞.取第3代细胞做流式检测,并定向诱导分化,14 d后成脂、成骨染色鉴定,21 d后取诱导分化的细胞团做冰冻切片,阿尔法蓝染色软骨鉴定.结果 体外培养的间充质干细胞高表达CD29、CD13、CD90、CD105、CD44等间充质细胞标志物,不表达CD34、CD45、人类白细胞抗原DR等造血细胞标志物;诱导分化后油红O染色、冯库萨染色均为阳性,冰冻切片阿尔法蓝染色呈明显阳性.结论 人脐带间充质干细胞在体外能够培养并定向分化为脂肪、骨、软骨细胞.