大鼠视神经少突胶质细胞培养方法的改良

摘要

目的 改良既往新生大鼠视神经组织块培养法体外培养少突胶质细胞.方法 新生2dSD大鼠,无菌条件下取双侧视神经,置于预先涂有多聚赖胺酸的培养皿中(直径3.5 cm),加入基础培养液约400μL;培养第4天时,更换为含0.5％胎牛血清化学限定培养液约400 μL;约第10天时,更换为无胎牛血清化学限定培养液约600 μL;第11天行髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)细胞免疫化学鉴定,计算阳性细胞百分率.重复培养3次,方差分析方法的稳定性.结果 视神经培养至第11天,每皿细胞数可达(6～8)×105个,90％以上为MBP阳性细胞;3次培养细胞的MBP免疫细胞化学染色阳性细胞百分率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本实验方法所得成熟少突胶质细胞纯度高,数量足够一般细胞生物学实验使用,且方法简便、稳定.