多重耐药鲍曼不动杆菌中ponA表达及其对碳青霉烯类抗生素诱导反应观察

摘要

目的 观察多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)中青霉素结合蛋白1a(PBP1a)基因ponA表达情况,以及ponA对碳青霉烯类抗生素诱导的反应.方法 收集MDR-AB菌株19株,采用PCR法检测ponA基因表达情况并进行测序.将MDR-AB与SDF ponA基因翻译的氨基酸序列进行同源建模,用分子可视化工具软件作结构相似性分析,并与鲍曼不动杆菌抗生素敏感株(SDF)进行比较.分别用三种碳青霉烯类抗生素(亚胺培南、美罗培南、多尼培南)对MDR-AB进行诱导,qRT-PCR检测ponA表达情况并进行测序.结果 19株MDR-AB均表达ponA基因,测序结果与Genbank中ATCC 17978标准菌株ponA序列显示98％同源.MDR-AB株与SDF株的ponA基因翻译氨基酸序列存在4处氨基酸变异,为第23位丝氨酸>丙氨酸、第47位丙氨酸>天冬氨酸、第110位异亮氨酸>亮氨酸、第128位谷氨酸>天冬氨酸;MDR-AB株与SDF株的ponA基因编码蛋白构象存在明显差异.亚胺培南组、美罗培南组、多尼培南组ponA基因相对表达量均低于未处理组(P均<0.05);抗生素诱导后的菌株未发现ponA基因突变.结论 MDR-AB中存在ponA基因表达,其翻译氨基酸序列及编码PBP1a蛋白构象均不同于SDF;碳青霉烯类抗生素诱导可导致MDR-AB中ponA基因表达下调.