附子理中丸灌胃后脾阳虚证大鼠海马组织β-EP、cAMP、PKA、神经元细胞μ受体表达观察

摘要

目的 观察附子理中丸灌胃的脾阳虚证模型大鼠海马组织β内啡肽(β-EP)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)及神经元细胞μ受体的表达变化.方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、自愈组,每组10只.模型组、中药组、自愈组采用饮食失节+劳倦等复合因素方法制作脾气虚模型,加用"苦寒泻下"法(连续灌服100％番泻叶)制作脾阳虚模型.空白组不做任何处理.造模后中药组予附子理中丸2 mL/(100 g·d)灌胃,1次/d,给药2周.①大鼠行为运动功能观察采用旷场实验检测各组大鼠行为学改变(水平运动距离、直立次数)采用YLS-13A大小鼠抓力测定仪检测各组大鼠前肢抓力.②分别于第2、4周处死各组大鼠,取海马组织,ELISA法检测海马组织β-EP、cAMP、PKA,免疫组化SABC法检测神经元细胞μ受体.结果 与空白组比较,模型组、自愈组大鼠水平运动距离和直立次数均降低(P均<0.01).与空白组比较,模型组大鼠前肢抓力下降(P<0.01);与模型组比较,中药组和自愈组大鼠前肢抓力增强(P均<0.01).与空白组比较,模型组及自愈组海马组织中β-EP含量升高、cAMP和PKA含量降低(P均<0.05);与模型组比较,中药组cAMP和PKA含量升高,自愈组PKA含量升高(P均<0.05);与自愈组比较,中药组海马组织中β-EP含量降低、cAMP和PKA含量升高(P均<0.05).与空白组比较,模型组、自愈组大鼠海马组织μ受体光密度升高(P均<0.05);与模型组比较,中药组大鼠海马组织中神经元细胞μ受体光密度降低(P<0.05);与自愈组比较,中药组大鼠海马组织中神经元细胞μ受体光密度降低(P<0.05).结论 附子理中丸可改善脾阳虚证模型大鼠的脾阳虚证"神疲、乏力"表征,其机制可能降低海马组织β-EP含量、升高cAMP及PKA含量、增加神经元细胞μ受体表达.