复治肺结核患者痰液耐药结核分枝杆菌鉴定中荧光定量PCR与反向点杂交技术的联合应用

摘要

目的 探讨荧光定量PCR联合反向点杂交技术在复治肺结核患者痰标本耐药结核分枝杆菌鉴定中的应用价值.方法 收集247例复治肺结核患者的痰标本,采用荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌DNA,采用反向点杂交技术检测结核分枝杆菌耐药基因,以结核分支杆菌分离培养结果和抗结核药敏试验结果为金标准进行分析评价.结果 247例复治肺结核患者痰标本中,抗酸杆菌涂片镜检、结核分支杆菌分离培养和PCR对结核分枝杆菌的检出率分别为36.03％、45.55％和55.07％,PCR与抗酸杆菌涂片镜检对结核分枝杆菌的检出率相比,P＜0.05;以结核分枝杆菌培养为金标准,PCR检出结核分枝杆菌的敏感度、特异度、阳性预测值阴性预测值分别为89.79％、72.88％、73.33％、89.58％,抗酸杆菌涂片镜检的敏感度、特异度、阳性预测值阴性预测值分别为69.38％、91.52％、87.18％、78.26％.以药敏试验结果为金标准,反向点杂交技术对利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇耐药基因的检出率分别为55.91％、49.46％、47.31％、31.18％.结论 联合应用荧光定量PCR与反向点杂交技术可快速、有效鉴定出复治肺结核患者痰标本中的耐药结核分枝杆菌.