茶黄素对人宫颈癌细胞株HeLa顺铂敏感性的影响及其机制

摘要

目的 探讨茶黄素对人宫颈癌细胞株HeLa顺铂敏感性的影响,并探讨其相关机制.方法 ①取对数生长期HeLa细胞接种于96孔板,设观察1～9组和对照1～9组,每组3个复孔.对照1～9组细胞分别加入0、5、10、15、20、25、30、35、40、50μg/mL顺铂,继续培养24 h.观察1～9组先加入10μg/mL的茶黄素,再分别加入0、5、10、15、20、25、30、35、40、50μg/mL顺铂,继续培养24 h.采用MTT法检测各组OD490,计算各组细胞存活率,然后计算顺铂对观察组和对照组HeLa细胞的半数抑制浓度(IC50).②取对数生长期HeLa细胞接种于96孔板.设对照组、顺铂组、茶黄素组和联合组,每组3个复孔.对照组细胞不加药,顺铂组加入10μg/mL的顺铂,茶黄素组加入10μg/mL的茶黄素,联合组加入10μg/mL的顺铂和10μg/mL茶黄素,继续培养24 h后,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Cleaved Caspase 3、Cleaved Caspase 9、PARP和NF-κB信号通路相关蛋白p-IκBα、p-NF-κB和p-Akt.结果 ①对照1～9组HeLa细胞存活率分别为102.54％±4.21％、98.32％±2.46％、96.11％±3.64％、90.36％±3.91％、86.29％±3.17％、81.46％±3.61％、78.92％±4.18％、70.63％±4.25％、63.28％±4.21％,顺铂对HeLa细胞的IC50为25μg/mL.观察1～9组HeLa细胞存活率分别为102.54％±4.21％、80.21％±3.82％、78.92％±4.24％、77.93％±3.95％、68.26％±3.24％、50.36％±4.29％、45.32％±4.74％、40.25％±3.21％、35.37％±3.16％,顺铂对HeLa细胞的IC50为10μg/mL.②顺铂组、茶黄素组、联合组细胞Cleaved Caspase 3、Cleaved Caspase 9、PARP相对表达量均高于对照组(P均<0.05),联合组细胞Cleaved Caspase 3、Cleaved Caspase 9、PARP相对表达量均高于顺铂组、茶黄素组(P均<0.05).顺铂组、对照组细胞p-IκBα、p-NF-κB和p-Akt相对表达量相比P>0.05,茶黄素组细胞p-IκBα、p-NF-κB和p-Akt相对表达量高于对照组(P均<0.05),联合组细胞p-IκBα、p-NF-κB和p-Akt相对表达量高于顺铂组和茶黄素组(P均<0.05).结论 茶黄素能够增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与增加凋亡相关蛋白Cleaved Caspase 3、Cleaved Caspase 9、PARP表达及抑制NF-κB信号通路相关蛋白p-IκBα、p-NF-κB和p-Akt表达有关.