实时荧光PCR定量测定肉制品中羊源性成分

摘要

为准确定量肉制品中羊源性成分的含量,以羊单拷贝基因为扩增靶基因,设计合成羊源的引物、探针,制备羊源和脊椎动物通用基因的重组质粒以构建标准曲线,通过方程算出各自的拷贝数,根据拷贝数的比值计算样品中羊肉源成分占总肉成分的百分比含量,建立荧光定量PCR检测体系,并对已知目标肉含量的混合肉样进行定量检测.结果 显示,该方法具有良好的特异性和灵敏度,最低检测到羊的DNA含量为0.02 ng/μL.对已知目标肉含量的混合肉样进行定量检测发现,羊肉掺入量为90％、50％时所得结果相对准确,相对标准偏差分别为5.69％和10.82％,且不受外源物种的干扰.本试验建立的定量PCR方法能够准确检测出不同样品中羊肉的含量,并发现存在掺假现象.