革兰氏染色三步法应用试验探讨

摘要

为了提高革兰氏染色实验的教学效果,应用革兰氏染色三步法,探讨了菌龄、涂片厚度、媒染时间和脱色、复染时间对染色结果的影响,并进行了革兰氏染色三步法与四步法的比较试验.获得正确染色结果的条件为:首先将大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金色葡萄球菌在琼脂斜面培养基上分别培养22～25 h、13～17 h和18-24 h;其次是做涂片时,取菌量要少于1/3环,涂菌稀薄、均匀;最后是染色.而染色的第1步是用结晶紫初染60 s;再用碘液媒染60～90 s;第3步用碱性品红乙醇溶液脱色、复染60～120 s.革兰氏染色三步法,基本原理没有改变,只是将四步法中乙醇退色和番红复染的两步合并在一步中进行,从而达到减少操作,提高效率的目的.