通用引物PCR方法快速检测兔眼真菌性角膜溃疡

摘要

目的应用真菌通用引物聚合酶链反应PCR,对兔眼真菌性角膜溃疡进行快速检测.方法建立兔眼烟曲霉菌、白色念珠菌和镰刀菌真菌性角膜溃疡的模型,根据国外文献报道的基因序列选出真菌通用引物,一对寡核苷酸引物B2F(5'-ACTTTCGTAGGATAG-3')和引物B4R(5'-TGATCGTCTTCGATAAATA-3')进行聚合酶链反应.结果在687bp处出现DNA扩增带者为阳性.动物造型3d后,通过PCR技术、常规刮片和培养3种实验室手段诊断为真菌性角膜炎的敏感性分别为90.0%、33.3%和40.0%;5d后,PCR技术、常规刮片和培养的敏感性分别为96.6%、50.0%和60.0%.结论通用引物PCR技术检测兔眼真菌性角膜溃疡快速、敏感、可靠.