芬戈莫德联合顺铂通过调控COL11A1表达对顺铂耐药胃癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的 探讨芬戈莫德(FTY720)联合顺铂(DDP)对DDP耐药胃癌细胞HGC27/DDP增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 HGC27/DDP细胞分为对照组(NC组)、DDP组(10μg/ml DDP干预)、FTY720组(10μmol/L FTY720干预)、FTY720+DDP组(10μg/ml DDP与10μmol/L FTY720共同干预)、si-NC组(转染乱序无意义阴性序列)、si-XI型胶原α1链(COL11A1)组(转染COL11A1小干扰RNA)、pcDNA-NC+FTY720+DDP组(10μg/ml DDP与10μmol/L FTY720共同干预转染空载体的细胞)和pcDNA-COL11A1+FTY720+DDP组(10μg/ml DDP与10μmol/L FTY720共同干预转染COL11A1过表达载体的细胞).四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)和COL11A1蛋白表达.结果 与NC组比较,FTY720组HGC27/DDP细胞存活率、CyclinD1蛋白表达及COL11A1的mRNA和蛋白表达均显著降低(P0.05).与DDP组或FTY720组比较,FTY720+DDP组HGC27/DDP细胞存活率、CyclinD1蛋白表达及COL11A1的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).与si-NC组比较,si-COL11A1组HGC27/DDP细胞存活率和CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).与pcDNA-NC+FTY720+DDP组比较,pcDNA-COL11A1+FTY720+DDP组HGC27/DDP细胞存活率和CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05),凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05).结论 FTY720联合顺铂可能通过下调COL11A1表达抑制顺铂耐药胃癌细胞HGC27/DDP增殖,并诱导细胞凋亡.