蝴蝶兰原生质体提取方法的优化

摘要

以蝴蝶兰自交品种NOⅡ的无菌苗叶片为试材,采用单因素试验和正交试验,比较不同酶的种类、酶液浓度、材料和酶液的比例、渗透压、酶解时间及纯化条件对原生质体产量和活性的影响,并用荧光显微镜观察去壁情况。结果表明:在同一种条件下1 g蝴蝶兰叶片加入10 mL酶解液中,酶解液含1.0%纤维素酶R-10,1.0%果胶酶,0.5 mol·L^(-1)甘露醇,酶解3 h,有活力的原生质体产量最高,其产量为1.3×10~5个·g^(-1),活性达81.90%。