结缔组织生长因子对NELL⁃1诱导的MC3T3⁃E1细胞成骨分化的影响

摘要

目的:探索结缔组织生长因子(CTGF)对尼克样1型蛋白(NELL⁃1)诱导的MC3T3⁃E1细胞成骨分化能力的影响。方法:以MC3T3⁃E1细胞为研究对象,分别使用PBS(对照)、NELL⁃1、CTGF和NELL⁃1+CTGF处理细胞,利用CCK⁃8法检测各组细胞增殖情况;成骨诱导后,利用茜素红染色和定量分析、碱性磷酸酶(ALP)活性检测和ALP染色、实时荧光定量PCR和Western blot实验检测各组细胞成骨分化情况。结果:与对照组相比,CTGF一定程度上抑制MC3T3⁃E1细胞增殖;NELL⁃1单独处理可诱导细胞形成更多矿化结节,增强ALP活性,加深ALP染色,明显提高Runt相关转录因子2(RUNX2)、ALP、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)等成骨形成基因的转录和蛋白表达水平(P<0.01)。与NELL⁃1单独处理组相比,NELL⁃1+CTGF联合处理组中细胞内矿化结节形成减少,ALP活性降低,ALP染色变浅,RUNX2、ALP、OSX等基因的转录和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:CTGF抑制NELL⁃1诱导MC3T3⁃E1细胞的成骨分化能力。