沉默PGC⁃1α表达对人根尖牙乳头干细胞定向分化的影响

摘要

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC⁃1α)在人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)定向分化中的作用。方法:hSCAPs矿化诱导0、3、7 d,实时荧光定量PCR检测PGC⁃1α的基因表达水平。转染小干扰RNA(siRNA)构建稳定低表达PGC⁃1α的hSCAPs,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测PGC⁃1α的表达水平,采用碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色分别检测ALP活性和矿化水平的变化,Western blot和实时荧光定量PCR检测成牙/骨向分化相关蛋白和基因的变化。结果:PGC⁃1α的基因表达水平在hSCAPs定向分化过程中逐渐上调。与对照组相比,低表达PGC⁃1α的hSCAPs其ALP表达量下降,矿化结节减少,牙本质涎磷蛋白(DSPP)、ALP、Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)等成牙/骨向分化相关指标表达水平下调(P<0.05)。结论:沉默PGC⁃1α表达可抑制hSCAPs定向分化。