黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中PINP和BMP-2表达的影响

摘要

探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中Ⅰ型前胶原N端前肽(Procollagen type I N-terminal Propeptide,PINP)和骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响.取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌操作分离小鼠股骨和胫骨,注射器冲出骨髓制成细胞悬液,传代3次后分为6组用于实验.空白诱导组仅加入等量成骨诱导培养基;阳性对照诱导组加入等量成骨诱导培养基及雌二醇(10-8mol/L);各PSP诱导组:加成骨诱导培养基和各自浓度的PSP(200、300、400、500 mg/mL).每天在倒置显微镜下观察各组细胞的生长情况及形态变化.倒置相差显微镜镜下观察细胞形态变化.在培养第7d、第14 d采用ELISA酶联免疫吸附法分别测量细胞PINP和BMP-2的表达量.实验结果显示小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长.各不同浓度PSP诱导组均比非诱导组高表达PINP和BMP-2(P ＜0.01).表明PSP呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,高浓度PSP可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中BMP-2和PINP的表达.