骨癌痛大鼠脊髓趋化因子受体2与P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的关系

摘要

目的探讨骨癌痛大鼠脊髓趋化因子受体2（CCR2）与P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）信号通路的关系, 进一步明确骨癌痛的发生机制。方法健康雌性SD大鼠共92只, 其中60只利用纤毛机械刺激针方法用于行为学试验, 采用随机数字表法分为以下6组（n=10）:假手术组（S组）、骨癌痛组（B组）、假手术+二甲亚砜（DMSO）溶剂组（SD组）、骨癌痛+DMSO组（BD组）、假手术+RS102895 CCR2抑制剂组（SR组）、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂组（BR组）。另外32只SD大鼠采用随机数字表法分为以下8组（n=4）:假手术组（S组）、骨癌痛5 d组（B5组）、骨癌痛9 d组（B9组）、骨癌痛14 d组（B14组）、骨癌痛+DMSO溶剂组（BD组）、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂后0.5 h组（BR0.5 h组）、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂后4 h组（BR4h组）、骨癌痛+RS102895 CCR2抑制剂后12 h组（BR12 h组）, 通过蛋白质印迹法（Western Blot）检测大鼠脊髓P38蛋白、磷酸化的P38（p-P38）和CCR2的表达水平。结果 S组造模后5、7、9、14、21 d的机械缩足反应阈值分别为（30.9±1.5）、（31.9±1.2）、（32.0±1.1）、（31.6±1.5）、（32.2±1.4）g, B组分别为（26.4±0.7）、（24.4±0.8）、（21.4±0.8）、（13.5±0.4）、（9.9±0.2）g, 与S组比较, B组造模后5、7、9、14、21 d时机械痛阈值降低, 差异均有统计学意义（t=-13.177、-16.660、-23.778、-35.574、-48.401, 均P＆0.01）。造模后第9天, SD组、BD组、SR组和BR组给药后4 h机械缩足反应阈值分别为（32.4±1.7）、（19.4±1.1）、（32.1±1.3）、（26.3±1.0）g, 差异有统计学意义（F=224.681, P＆0.01）;与SD组比较, BD组机械痛阈值降低;与BD组比较, BR组机械痛阈值升高。S组、B5组、B9组、B14组大鼠脊髓p-P38表达水平分别为（0.08±0.03）、（0.20±0.05）、（0.40±0.17）、（0.65±0.14）, CCR2表达水平分别为（0.08±0.04）、（0.18±0.05）、（0.30±0.09）、（0.58±0.07）, 差异均有统计学意义（F=19.123、40.746, 均P＆0.01）;与S组比较, B9组大鼠脊髓p-P38和CCR2表达上调。造模后第9天, BD组、BR0.5 h组、BR4 h组和BR12 h组大鼠脊髓p-P38表达水平分别为（0.57±0.06）、（0.17±0.11）、（0.03±0.01）、（0.25±0.11）, 差异有统计学意义（F=29.582, P＆0.01）;与BD组比较, BR0.5 h组、BR4 h组、BR12 h组大鼠脊髓p-P38表达明显下调。结论脊髓CCR2可能通过激活P38MAPK信号通路参与了大鼠骨癌痛痛觉过敏的发生。