抗人精浆蛋白单链抗体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定

摘要

目的在HeLa细胞中表达抗人γ-精浆蛋白(γ-Sm)单链抗体(scFv)基因,并进行亲和活性测定. 方法在已经构建抗人γ-Sm scFv基因基础上,将基因克隆入真核分泌表达载体pSecTag2-B中,并转染HeLa细胞进行表达.表达产物纯化后,用流式细胞仪进行亲和活性测定. 结果表达产物经SDS-PAGE和Western印迹实验证实为约30 ku的特异蛋白条带,纯化后经流式细胞仪检测可以特异性地结合PC-3细胞. 结论获得了可与PC-3细胞特异结合的抗人γ-Sm scFv,为进一步临床应用奠定基础.