传代对残耳软骨细胞体内软骨形成能力的影响

摘要

目的：研究传代对残耳软骨细胞体内软骨形成能力的影响。方法分离培养人残耳软骨细胞，将第3-8代细胞分别复合聚羟基乙酸/聚乳酸支架，构建组织工程化软骨；体外培养4周后植入裸鼠体内观察8周。采用组织学染色观察各组标本的软骨形成情况；Real-time PCR检测软骨分化相关基因的表达；生物力学分析新生软骨的弹性模量。结果各代复合物体外培养4周时均不能形成软骨组织，但第3-5代残耳软骨细胞COL 2A1、第3-4代的SOX 9和第3代的DLK 1仍可维持较高的表达水平（P〈0.05）；体内植入8周后，第3-6代复合物均有不同程度的弹性软骨结构形成，并随代次增高而减少，第3-6代复合物的弹性模量明显高于第7、8代。结论残耳软骨细胞传至第4代仍能保持良好的体内软骨形成能力，但扩增传代对残耳软骨细胞软骨表型去分化的影响在第7代后已无法逆转。