高凝状态大鼠肝脏差异表达基因反向消减cDNA文库的初筛

摘要

目的　对本室构建的高凝状态 (PTS)大鼠肝脏差异表达基因反向消减 c DNA文库进行初步筛选。方法　用巢式 PCR扩增法制备“正向”和“反向”消减 c DNA探针 ;采用差异筛选方法 ,用这两种探针对 PTS大鼠肝脏差异表达基因反向消减 c DNA文库进行筛选 ;将获得的阳性克隆 c DNA进行序列分析 ;并与 Gen Bank DNA数据库 (non- redundant,and non- mouse and non- hum an EST entries)中的 DNA序列进行同源性分析。结果　差异筛选获得 5个阳性克隆 ,序列测定及同源性分析表明 ,其中 2个克隆很可能是 Gen Bank DNA数据库中尚没有的新基因或 DNA序列 ,另外 3个克隆很可能代表 Gen Bank DNA数据库中已有的基因或 DNA序列。结论　大鼠肝脏 5个PTS相关基因序列、尤其是其中 2个 Gen Bank中尚没有的新基因或新 DNA序列的发现 ,为深入探讨 PTS发生的分子机制及肝脏在