SD大鼠Sirt1基因真核表达的研究

摘要

用RT-PCR扩增含有XhoI/EcoRI酶切位点的Sirt1片段,克隆、测序后,构建真核荧光表达载体pEGFP-N1-Sirt1、脂质体介导转染293细胞,最后利用SDS-PAGE检测蛋白表达情况.结果表明,经脂质体介导重组体pEGFP-N1-Sirt1可成功转染293细胞;转染48h后.荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达;SDS-PAGE证明表达的融合蛋白相对分子质量约为41kD.该结果为进一步研究Sirt1在哺乳动物细胞中的作用奠定了基础.