抑制TRAF6基因表达对自身免疫性肝炎大鼠肝组织NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

摘要

目的 探讨抑制TRAF6基因表达对自身免疫性肝炎(AIH)大鼠肝组织NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响.方法 随机将40只SD大鼠分为对照组、模型组、空载体组和TRAF6 shRNA干扰组,每组10只,采用特异性抗原S-100诱导建立大鼠AIH模型,分别给予生理盐水、转染空载体和转染TRAF6 shRNA处理.采用免疫组化法检测肝组织TRAF6蛋白表达,采用qRT-PCR法检测肝组织TRAF6 mRNA水平,采用ELISA法检测肝组织匀浆白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)水平,采用Western blot检测肝组织NF-κB信号通路相关基因蛋白表达.结果 模型组大鼠肝组织TRAF6 mRNA水平为(6.2±0.4),显著高于正常组(1.0±0.2,P<0.05),而TRAF6 shRNA干预组大鼠肝组织TRAF6 mRNA水平为(1.5±0.2),较模型组显著降低(P<0.05);模型组大鼠肝组织匀浆IL-1β水平为(60.3±8.1)pg/mL,IL-6水平为(41.5±5.9)pg/mL,均显著高于正常组[(8.9±0.6)pg/mL和(15.6±0.6)pg/mL,P<0.05];模型组大鼠肝组织IκBα、NF-κB p65、NF-κB p50、p-NF-κB p65和p-NF-κB p50蛋白表达相对水平分别为(1.3±0.1)、(1.6±0.1)、(1.3±0.1)、(1.3±0.1)和(1.1±0.1),均显著高于正常组[分别为(0.3±0.03)、(0.3±0.02)、(0.3±0.03)、(0.3±0.03)和(0.3±0.03),P<0.05],而抑制了TRAF6表达组大鼠肝组织IL-1β为(31.5±4.0)pg/mL,IL-6为(27.4±4.2)pg/mL,IκBα、NF-κB p65、NF-κB p50、p-NF-κB p65和p-NF-κB p50蛋白表达分别为(1.0±0.1)、(0.9±0.05)、(0.7±0.1)、(0.8±0.1)和(0.5±0.05),均显著低于模型组(均P<0.05).结论 抑制TRAF6基因表达可降低AIH大鼠肝内炎症水平,从而能改善肝组织损伤,其机制可能与调节了NF-κB信号通路的活化有关.