黄毛耳草化学成分及其中车叶草苷和京尼平苷的含量测定研究

摘要

目的研究黄毛耳草(Hedyotis chrysotricha)全草的化学成分,并采用高效液相色谱(HPLC)法对其主要成分车叶草苷和京尼平苷进行含量测定。方法采用微孔树脂(MCI)柱及半制备高效液相色谱等技术,对其醇提物进行系统分离,得到单体;采用质谱(MS)、核磁共振(NMR)等波谱技术鉴定其结构。定量分析采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法;色谱柱为Welch Ultimate XB-C 18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈∶0.1%甲酸水溶液(13∶87)为流动相;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:240 nm,柱温:30℃;进样量10μL。结果从植物中共分离到14个化合物,分别鉴定为(24 R)-stigmastane-3β,5α,6β-triol(1)、24ξ-ethylcholest-22 E-ene-3β,5α,6β-triol(2)、5-stigmasten-3β,7β-diol(3)、豆甾醇(4)、β-谷甾醇(5)、hyptatic acid B(6)、6β-hydroxyursolic acid(7)、齐墩果酸(8)、车叶草苷(9)、车叶草酸(10)、京尼平苷(11)、aitchisonide A(12)、3 S,5 R,6 R,9 S-tetrahydroxy-7 E-megastigmene(13)及(6 S,9 R)-roseoside(14)。首次基于2D-NMR数据完整归属了化合物6的氢谱数据;含量测定结果表明,车叶草苷和京尼平苷分别在12.80~128.00μg·mL^-1(r=0.9990)、3.00~30.00μg·mL^-1(r=0.9993)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为103.19%(RSD=2.40%)、95.06%(RSD=3.90%)。结论共分离鉴定14个化合物,其中,7个化合物(1~3、6、7、12、13)为首次从耳草属植物中分离,14为首次从黄毛耳草中得到;采用高效液相色谱-二极管阵列检测器建立车叶草苷和京尼平苷含量测定方法,10个批次中该两个化合物含量分别为0.733~2.282及0.080~0.328 mg·g^-1,方法简便准确,可作为该药材环烯醚萜苷的质量控制方法。