黄毛耳草化学成分及其中车叶草苷和京尼平苷的含量测定研究

摘要

目的 研究黄毛耳草(Hedyotis chrysotricha)全草的化学成分,并采用高效液相色谱(HPLC)法对其主要成分车叶草苷和京尼平苷进行含量测定.方法 采用微孔树脂(MCI)柱及半制备高效液相色谱等技术,对其醇提物进行系统分离,得到单体;采用质谱(MS)、核磁共振(NMR)等波谱技术鉴定其结构.定量分析采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法;色谱柱为Welch Ultimate XB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈:0.1％甲酸水溶液(13:87)为流动相;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:240 nm,柱温:30℃;进样量10μL.结果 从植物中共分离到14个化合物,分别鉴定为(24R)-stigmastane-3β,5α,6β-triol(1)、24ξ-ethylcholest-22E-ene-3β,5α,6β-triol(2)、5-stigmasten-3β,7β-diol(3)、豆甾醇(4)、β-谷甾醇(5)、hyptatic acid B(6)、6β-hydroxyursolic acid(7)、齐墩果酸(8)、车叶草苷(9)、车叶草酸(10)、京尼平苷(11)、aitchisonide A(12)、3S,5R,6R,9S-tetrahydroxy-7E-me-gastigmene(13)及(6S,9R)-roseoside(14).首次基于2D-NMR数据完整归属了化合物6的氢谱数据;含量测定结果 表明,车叶草苷和京尼平苷分别在12.80～128.00μg·mL-1(r=0.9990)、3.00～30.00μg·mL-1(r=0.9993)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为103.19％(RSD=2.40％)、95.06％(RSD=3.90％).结论 共分离鉴定14个化合物,其中,7个化合物(1～3、6、7、12、13)为首次从耳草属植物中分离,14为首次从黄毛耳草中得到;采用高效液相色谱-二极管阵列检测器建立车叶草苷和京尼平苷含量测定方法 ,10个批次中该两个化合物含量分别为0.733～2.282及0.080～0.328 mg·g-1,方法 简便准确,可作为该药材环烯醚萜苷的质量控制方法 .