高效液相色谱法测定小鼠血浆中8-甲氧基补骨脂素及其药代动力学研究

摘要

目的:建立小鼠血浆中8-甲氧基补骨脂素(8-methoxypsoralen,8-MOP)的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定方法,并应用于8-MOP在小鼠体内的药代动力学研究。方法:以5-甲氧基补骨脂素为内标,Waters Symmetry~C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,等度洗脱,流动相为甲醇-水(体积比55∶45),流速为1.0 m L/min,荧光检测器检测,激发波长与发射波长分别为334 nm和484 nm,内标法定量。60只雄性健康的ICR小鼠随机分为12组,对照组以1%(质量分数)吐温80灌胃给药,其余11组小鼠灌胃给药8-MOP(40 mg/kg),HPLC法测定给药后不同时间点小鼠血浆中8-MOP的浓度,DAS 2.0软件计算药代动力学参数。结果:小鼠血浆中8-MOP在0.05~10.00 mg/L范围内线性良好(r=0.999 3),检出限为0.015 mg/L;高、中、低3种浓度8-MOP的加标回收率为92.5%~100.6%;日内精密度为3.3%~8.2%,日间精密度为3.4%~6.7%;提取回收率为90.9%~92.0%;小鼠血浆样品在-80℃下至少可以保存15 d。小鼠灌胃给药后5 min即可在小鼠血浆中检出8-MOP(1.4 mg/L),给药2 h血药浓度达到最高峰值,且给药后24 h仍可检出(1.1 mg/L)。t_(1/2)为(39.21±3.65)h,C_(max)为(2.31±0.02)mg/L,t_(max)为(2.00±0.00)h,AUC_(0-t)为(33.34±1.19)(h·mg)/L。结论:该方法准确、简便,适用于小鼠体内8-MOP药代动力学研究。