基质细胞衍生因子1对人牙髓干细胞增殖、迁移和成牙本质能力的影响

摘要

目的:对比基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)和粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)对人牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)的体外增殖、迁移和成牙本质能力的影响。方法:分别在培养基中加入100μg/L SDF-1或100μg/L G-CSF,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和集落形成实验(colony-forming unit,CFU)检测SDF-1和G-CSF对DPSC增殖的影响;采用划痕实验和Transwell迁移实验检测两者对DPSC迁移能力的影响;对DPSC进行成牙本质诱导,通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、测定ALP活性、茜素红染色和real-time RT-PCR检测成牙本质相关基因的表达,以检测两者对DPSC体外成牙本质能力的影响。结果:SDF-1和G-CSF能够轻度提高DPSC的增殖及集落形成能力,但差异无统计学意义。加入SDF-1或G-CSF的实验组划痕汇合速率明显高于对照组(P<0.01),但两种因子间差异无统计学意义。Transwell迁移实验中,对照组每视野的迁移细胞数量为(5.0±1.4)个,SDF-1组每视野的迁移细胞数量为(24.3±6.8)个,G-CSF组每视野的迁移细胞数量为(11.8±3.3)个,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。经成牙本质诱导后,实验组细胞ALP染色加深,ALP活性上升,矿化结节形成数量增加,成牙本质相关基因的表达均显著高于对照组。结论:SDF-1对DPSC的增殖能力影响不显著,但能明显提高DPSC的迁移能力和成牙本质分化能力,效果优于G-CSF。