产纤维素酶沙棘根瘤内生放线菌的筛选、鉴定及其酶活性测定

摘要

以中国沙棘根瘤中分离纯化得到的内生放线菌为材料,筛选高产纤维素酶的菌株,并对其产生的纤维素酶活性进行检测.实验以羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为唯一碳源,结合CMC-Na刚果红染色水解圈法筛选得到1株高产纤维素酶的放线菌,利用插片法观察其显微形态特征,结合生理生化试验及16SrRNA基因序列分析,鉴定出该纤维素酶高产菌为橄榄色链霉菌(Streptomycesolivaceus).通过3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定该菌株产纤维素酶的活性,并利用单因素法对该菌株的产酶条件进行了优化.结果表明,该菌株产纤维素酶的最适pH为7.0,温度为28℃、160r·min^-1振荡培养48h后,该菌株所产生的纤维素酶活性最大,酶活性为46.3U·mL^-1.