一株产纤维素酶细菌的筛选、鉴定及其纤维素酶的部分特性

摘要

目的：分离堆肥中具有产纤维素酶酶活的菌株并进行鉴定,同时进行该菌株纤维素酶酶特性的研究。方法：采用刚果红平板法进行筛选得到菌株,利用16SrDNA通用引物对其基因组DNA进行扩增,测序得到GCH-1的部分16SrDNA序列,经Blastn调出与菌株16SrDNA同源的序列,用软件MEGA 4.0按照Neighbor-Joining方法构建16SrDNA系统发育树,并采用DNS法测定所产纤维素酶酶活。结果：GCH-1的生理生化指标与蜡质芽胞杆菌理化指标相符,与Bacillus cereusIAM 12605（T）处于同一分支,相似性为99.8%.GCH-1菌株发酵48h能达到最大产酶量,所产纤维素酶在40℃有最高酶活力,酶活力分别为0.581u/mL,GCH-1菌株产生的纤维素酶酶系在pH 7.0-9.0能够保持较高的相对酶活力,超过85%相对活力。结论：GCH-1初步鉴定为蜡质芽孢杆菌（Bacillus cereus）,能够产胞外纤维素酶。