共聚焦激光扫描显微镜扫描步距与三维重建质量的关系

摘要

目的探讨用共聚焦激光扫描显微镜对厚样本进行光学断层时,扫描步距对三维重建的质量影响.方法用醛处理法诱导大鼠主动脉弹性纤维产生强自发荧光,在共聚焦激光扫描显微镜下对主动脉壁进行全层光学断层.分析扫描步距等参数变化对内弹性膜构筑三维重建质量的影响.结果①探测针孔直径等于1个爱俐斑单位且满足离开焦点1/2 Z-轴分辨率距离时,焦平面最强荧光信号减弱50%,此条件下获得的二维光学切片分辨率和信息的完整性达最佳平衡. ②在上述条件下,扫描步距等于Z-轴分辨率时,重建结构信息完整;扫描步距小于Z-轴分辨率时,原位重建结构的信号被人为加强,旋转重建结构出现重影;扫描步距大于Z-轴分辨率时,重建结构出现出现信息损失.结论以Z轴分辨率为扫描步距进行光学断层和重建,可获得分辨率、信息完整性和信息不重叠性达最佳三维重建效果.