人肝癌组织中APRIL及其受体mRNA水平的定量测定

摘要

目的:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)技术分析肝癌组织中增殖诱导配体(A-PRIL)及其受体mRNA的表达水平.方法:在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量,并以靶基因和内参β2M mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标.结果:RFQ-PCR检测靶基因mRNA含量的线性范围为10～109pg/ml,批内和批间重复性测定的变异系数V分别为3.87%～10.12%和6.86%～12.29%.20例肝癌组织样本的检测结果显示肝癌及癌旁组织中APRIL和BCMA的水平均显著高于远端正常组织(P＜0.01),而TACI的表达水平在三组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;而且发生APRIL在肝癌发生、发展过程中可能起了重要作用,有可能还参与了肿瘤细胞的转移,并主要是通过受体BCMA而不是TACI的作用.