实时荧光定量聚合酶链反应

摘要： 目的探讨血清miR-483-5p和miR-532-5p水平对卵巢癌手术后2年内复发的预测效能。方法选择2017年1月至2019年6月在该院手术的116例卵巢癌患者为卵巢癌组,75例诊断卵巢良性肿瘤的患者为良性肿瘤组,45例体检健康女性为健康对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测卵巢癌组手术前后、良性肿瘤组及健康对照组血清miR-483-5p和miR-532-5p水平。结果卵巢癌组血清miR-483-5p水平高于良性肿瘤组和健康对照组(P<0.05),良性肿瘤组血清miR-483-5p高于健康对照组(P<0.05),卵巢癌手术后血清miR-483-5p水平较手术前降低(P<0.05);卵巢癌组血清miR-532-5p水平低于良性肿瘤组和健康对照组(P<0.05),良性肿瘤组血清miR-532-5p低于健康对照组(P<0.05),卵巢癌手术后血清miR-532-5p水平较手术前升高(P<0.05)。血清miR-483-5p和miR-532-5p水平在不同肿瘤组织分化程度、临床分期和有无淋巴转移的卵巢癌患者中差异均有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌复发患者血清miR-483-5p水平高于无复发患者(P<0.05),而miR-532-5p水平低于无复发患者(P<0.05)。血清miR-483-5p和miR-532-5p联合检测预测卵巢癌患者手术后2年内复发的曲线下面积为0.907,高于miR-483-5p、miR-532-5p单独检测的0.819、0.828(Z=2.784、2.286,P<0.05)。结论miR-483-5p和miR-532-5p与卵巢癌关系密切,对卵巢癌手术后2年内复发具有较高的预测价值。

摘要： 目的研究不同灭活方式对携带新型冠状病毒的物体表面标本核酸检测结果的影响。方法25份核酸检测结果为阳性的物体表面标本,每份标本分为4份,分别采用4~8°C未灭活(未灭活组),以及60°C水浴30 min、56°C水浴45 min、75%乙醇30 min灭活处理(灭活组),比较不同处理方式的平均循环阈值(Ct值)。结果未灭活组和灭活组Ct值比较,差异有统计学意义(ORF基因:F=48.740,Eta=0.720,P0.05),Ct值比较接近;随着Ct值的增大,未灭活组和灭活组处理差别逐渐加大,当未灭活组ORF基因Ct值>36时,灭活组不同处理方式的ORF基因的全部Ct值>40;而未灭活组ORF基因Ct值≥34时,75%乙醇30 min处理ORF基因Ct值>40。结论携带新型冠状病毒的物体表面标本在核酸检测前进行灭活处理,核酸检测阳性结果有可能转阴,75%乙醇处理相比60°C水浴30 min和56°C水浴45 min处理转阴的概率更大。

摘要： 目的探究实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法在结核分枝杆菌(MTB)耐药性中的应用价值。方法选择2018年10月至2020年11月我院收治的结核病患者84例,采用FQ-PCR法分析,以罗氏药敏比例法作为检测MTB耐药性的“金标准”,分析FQ-PCR法在MTB耐药性中的应用价值。结果FQ-PCR法分析MTB耐药性中各药物灵敏度、特异度、阳性预测值比较差异有统计学意义(P0.05)。kappa检验显示:对阿米卡星检测一致性不佳(kappa值为0.279);对利福平、异烟肼、莫西沙星及乙胺丁醇一致性尚可(kappa值分别为0.637、0.631、0.578、0.623);对链霉素一致性良好(kappa值为0.815)。结论FQ-PCR法在MTB耐药性分析中具有较高的临床应用价值,优势明显,可为临床诊断及用药提供可靠依据。

摘要： 目的 观察成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(CDKN2A)在T1期非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)的表达情况,及其对预后的预测价值。方法 回顾性收集62例T1期NMIBC患者的肿瘤组织蜡块,所有患者均行经尿道膀胱电切术。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测FGFR3和CDKN2A的mRNA表达,并分析与临床资料的关系。分别应用角蛋白5(KRT5)和角蛋白20(KRT20)作为基底亚型和管腔亚型的标志物。结果 FGFR3与CDKN2A mRNA的表达无相关,与KRT5(rs=0.297,P=0.005)和KRT20mRNA的表达均呈正相关(rs=0.314,P<0.001);FGFR3高表达与肿瘤分级呈负相关(rs=-0.37,P<0.001);CDKN2A与KRT5mRNA的表达呈负相关(rs=-0.331,P=0.021)。FGFR3mRNA高表达组的患者具有更差的肿瘤无复发(RFS),但肿瘤无进展生存(PFS)和总生存(OS)有所提高,CDKN2A mRNA高表达组的患者具有更差的OS。高龄(≥70岁)和FGFR3高表达与复发风险增加显著相关;FGFR3高表达与降低OS显著相关。结论 对于T1期NMIBC患者,FGFR3mRNA高表达可能预示着较差的RFS,但OS更好。

摘要： 目的:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法定期检测费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者外周血中BCR/ABL融合基因表达的动态变化,为患者制订不同的治疗方案,以提高患者总生存(OS)率。方法:回顾性分析20例初治和难治复发Ph+ALL患者的临床资料,经过酪氨酸激酶抑制剂(TKI)+长春新碱+强的松(TKI+VP)或者酪氨酸激酶抑制剂+长春新碱+柔红霉素+强的松(TKI+VDP)等多种化疗方案诱导治疗,17例患者达到血液学完全缓解(HCR),3例未缓解(NR)。其中HCR患者中8例患者微小残留病(MRD)为阴性,3例患者选择自体造血干细胞移植(Auto-HSCT),在造血功能重建后均接受了TKI维持治疗至今;另5例MRD阴性患者、9例MRD阳性患者和3例NR患者均进行了异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)。所有患者分别在干细胞移植前和移植后1、2、3、6、9及12个月进行外周血BCR/ABL融合基因检测,评估患者的MRD。Allo-HSCT组患者造血重建后,均给予TKI口服干预治疗,其后基因检测持续阴性者,TKI口服干预治疗1年后停用。治疗期间如果监测MRD转阳则依据移植时间给予更换有效TKI药物或减停免疫抑制剂等治疗措施。结果:全组患者造血干细胞移植后均达到造血重建,粒细胞植活中位时间为14(11~24)d,血小板植活中位时间为17(13~52)d。随访至2020年12月,中位随访时间为52(3~111)个月。全组患者3年OS率为(61.1±11.7)%。Allo-HSCT组和Auto-HSCT组患者移植后3年OS率分别为(52.8±13.4)%和100.0%,组间比较差异无统计学意义(P=0.178)。移植前MRD阴性组和移植前HCR但MRD阳性组患者3年OS率分别为(87.5±11.7)%和(42.8±15.6)%,组间比较差异无统计学意义(P=0.065)。移植前NR的患者全部死亡。全组死于疾病复发5例,死于肺感染1例,死于Ⅳ度急性移植物抗宿主病(GVHD)1例。结论:对Ph+ALL患者依据BCR/ABL融合基因检测结果的动态变化选择Auto-HSCT或Allo-HSCT及术后分层干预治疗措施,可提高患者的OS率。

摘要： 目的建立一种可进行双重相对定量的基于重复序列的荧光定量聚合酶链反应(SD-qPCR)方法,实现单管同时检测X和Y染色体数目。方法建立双重相对定量SD-qPCR检测体系,并将其用于197例羊水样本的检测。根据重复序列间的相对定量2-ΔΔCt值来判断样本X和Y染色体的数目,将检测结果与染色体核型分析结果进行比较。结果筛选出了2对重复序列分子标记,分别定位于16号染色体、X染色体和1号染色体、Y染色体;197例羊水样本中,性染色体数目正常样本185例;45,X样本5例;47,XXX样本3例;47,XXY样本2例;47,XYY样本2例。双重相对定量SD-qPCR检测结果与染色体核型分析结果一致。结论建立的双重相对定量SD-qPCR方法可实现单管同时检测X和Y染色体的数目,具有检测位点多、检测结果稳定的特点,可在临床推广使用。

摘要： 为了深入揭示植物抗氧化酶的相关基因及其响应重金属胁迫的作用机制,以重金属铅(Pb)超富集植物金丝草[Pogonatherum crinitum(Thunb.)Kunth.]为研究对象,设置Pb浓度0、300、500、1 000 mg·L^(-1)和2 000 mg·L^(-1)的水培模拟胁迫试验,测定不同Pb浓度下金丝草叶片的抗氧化酶活性,并对Pb胁迫处理的金丝草叶片进行RNA-Seq测序,将转录组测序得到的Unigenes通过GO与KEGG富集注释,筛选出叶片抗氧化酶相关的DEGs,并利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进行验证。结果表明:随Pb胁迫浓度的增加,金丝草叶片过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性呈增加趋势,丙二醛(MDA)含量则呈先增加后降低的趋势;转录组测序得到总碱基数为56.34 Gb,各样品碱基质量达到Q20、Q30水平的均大于90%,测序结果可靠;筛选出的DEGs通过GO与KEGG数据库进行对比注释发现,金丝草叶片DEGs在“过氧化物酶体”“氧化还原酶活性”“氧化还原酶活性,作用于CH-OH供体组”“活性氧代谢过程”和“过氧化氢代谢过程”等与抗氧化相关的GO功能条目上显著富集,在“谷胱甘肽代谢”“抗坏血酸和醛糖代谢”“植物激素信号转导”“黄酮类生物合成”和“MAPK信号通路-植物”等与抗氧化相关的KEGG通路上显著富集;Pb胁迫下金丝草叶片抗氧化酶相关基因PcSOD、PcPOD和PcCAT上调表达,qRT-PCR验证结果与转录组测序结果一致,Pb胁迫下这些基因的相对表达量与抗氧化酶活性的变化趋势一致。研究表明,金丝草可通过提高抗氧化酶活性来适应Pb胁迫,抗氧化酶相关基因PcSOD、PcPOD和PcCAT参与了金丝草应对Pb胁迫的调控过程。

摘要： 流感是至今尚无法完全控制的一种病毒性急性呼吸道传染病,同时也是国际上第一个实现全球监测的传染病[1]。为使阳泉市流感监测走向系统、全面和科学化,阳泉市疾病预防控制中心于2009年加入全国流感监测网络实验室,现将2015—2019年实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)检测阳性样本进行分离培养,分析CT值与流感病毒分离率的影响关系。

摘要： 数字PCR技术是一种能够进行绝对定量的核酸检测技术,与实时荧光定量PCR技术相比,该技术敏感性更高、定量不依赖于标准曲线、对反应抑制物的耐受能力也更高。目前,该技术在转基因检测、物种鉴定、疾病诊断、病原微生物鉴定和精确定量分析等领域具有较广阔的应用前景。论文对数字PCR的发展历史、原理、优缺点及在动物疫病诊断中的应用进行了综述,以期为提高动物疫病诊断能力的提供借鉴。

摘要： 目的 分析弥漫大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B-cell Lymphoma,DLBCL)患者微小RNA-125(microRNA-125,miR-125)表达水平与临床病理参数及预后的关系.方法 回顾性分析2015年3月-2017年3月四川大学华西医院血液内科收治的148例DLBCL患者的临床资料,列为DLBCL组.取同期收治的淋巴结反应性增生(Reactive Hyperplasia of Lymph Node,RH)患者35例列为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链方法(Real-Time Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测组织标本miR-125表达,分析其与DLBCL病理特点及预后的关系.结果 DLBCL组组织miR-125表达水平(3.514±1.101)明显高于对照组(0.362±0.097,P245 U/L、国际预后指数(International Prognostic Index,IPI)评分3～5分、结外累及≥2处、Ki-67指数≥75％的DL-BCL患者miR-125表达水平更高(P<0.05);低miR-125表达组总生存率为97.4％,中位生存时间为36.30个月;高miR-125表达组总生存率为77.1％,中位生存时间为33.67个月,两组生存情况比较(Log Rank χ2=4.488,P=0.034<0.05).结论 DLBCL组组织miR-125呈异常高表达,且与免疫表型、乳酸脱氢酶水平、IPI评分及Ki-67指数有关,参与DLBCL发病及进展过程,且对预后存在一定的影响.

摘要： 目的：观察芪麝丸对长期直立大鼠腰椎骨质增生的作用,探讨药物可能的作用机制。rn 方法：30只SD大鼠随机分为四组,对照组不进行处理,普通饲养笼喂养；模型组和芪麝丸组建立长期直立大鼠模型。用药组在术后8个月开始灌胃,连续灌胃一月,所有动物术后9个月处死,L5椎体藏红染色、天狼猩红染色、免疫组织化学法观察；余下腰椎生长板及椎间盘应用实时荧光定量聚合酶链反应(real time reverse transcriptionpolymerass chain reaction,real time RT-PCR)技术检测(type Ⅰ collegan,Col Ⅰ的亚型Col1lα2)、 (type Ⅹcollegan.Col Ⅹ的亚型Col10α1)、转化生长因子beta1(transform growth factor beta1,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、一种核转录因子(core binding factor alpha1,Runx2)基因的表达。rn 结果：藏红染色显示模型组椎体边缘-椎间盘连接处非基质成分增加,发生骨质增生；对照组改变不明显。用药组较模型组比,相同部位非基质成分较少；天狼猩红染色示正常组椎体边缘-椎间盘连接处胶原排列致密,模型组该处Ⅰ型胶原增多,Ⅲ型胶原增多；用药组椎体边缘-椎间盘连接处胶原致密,以Col Ⅰ为主。免疫组化示模型组骨质增生形成部位ColⅩ,VEGF,TGF-β1表达均较对照组增强,用药组ColⅩ表达均较模型组减少,而TGF-β1表达无明显改变,用药组VEGF表达量较模型组稍有减少。Real time RT-PCR示用药组较模型组下调Col10β1和Runx2基因表达(P＜0.01)。rn 结论：芪麝丸能延缓腰椎边缘-椎间盘连接处骨质增生,与减少Ⅹ型胶原表达有关。

摘要： 为建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,本试验首先进行了PEDV全序列多重比较,然后,基于保守区序列,设计了一对检测PEDV特异性引物,通过RT-PCR、克隆、提取、纯化、定量分析等步骤制备标准品.经优化反应条件建立标准曲线,用PCR和其它常规方法对其特异性、灵敏性、重复性进行比较评估,评估结果表明所建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法具有良好特异性,对PRRSV、CSFV、TGEV等常见肠道病原体没有交叉扩增反应;该方法敏感性高:可达102拷贝/μL.应用所建立的方法对江西省125份腹泻样品进行检测,PEDV检出率为92.8％,较常规RT-PCR检测方法76.8％的检出率高16％;该方法重复性好:对检测结果统计学分析表明批内、批间试验的变异系数分别为0.19％～0.53％和0.3％～2.1％.该试验所建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度更高,重复性好,且简单、快速,可用于PEDV早期感染猪群的诊断和定量分析及流行病学调查.

摘要： 为建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,本试验首先进行了PEDV全序列多重比较,然后,基于保守区序列,设计了一对检测PEDV特异性引物,通过RT-PCR、克隆、提取、纯化、定量分析等步骤制备标准品.经优化反应条件建立标准曲线,用PCR和其它常规方法对其特异性、灵敏性、重复性进行比较评估,评估结果表明所建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法具有良好特异性,对PRRSV、CSFV、TGEV等常见肠道病原体没有交叉扩增反应;该方法敏感性高:可达102拷贝/μL.应用所建立的方法对江西省125份腹泻样品进行检测,PEDV检出率为92.8％,较常规RT-PCR检测方法76.8％的检出率高16％;该方法重复性好:对检测结果统计学分析表明批内、批间试验的变异系数分别为0.19％～0.53％和0.3％～2.1％.该试验所建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度更高,重复性好,且简单、快速,可用于PEDV早期感染猪群的诊断和定量分析及流行病学调查.

摘要： 为建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,本试验首先进行了PEDV全序列多重比较,然后,基于保守区序列,设计了一对检测PEDV特异性引物,通过RT-PCR、克隆、提取、纯化、定量分析等步骤制备标准品.经优化反应条件建立标准曲线,用PCR和其它常规方法对其特异性、灵敏性、重复性进行比较评估,评估结果表明所建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法具有良好特异性,对PRRSV、CSFV、TGEV等常见肠道病原体没有交叉扩增反应;该方法敏感性高:可达102拷贝/μL.应用所建立的方法对江西省125份腹泻样品进行检测,PEDV检出率为92.8％,较常规RT-PCR检测方法76.8％的检出率高16％;该方法重复性好:对检测结果统计学分析表明批内、批间试验的变异系数分别为0.19％～0.53％和0.3％～2.1％.该试验所建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度更高,重复性好,且简单、快速,可用于PEDV早期感染猪群的诊断和定量分析及流行病学调查.

摘要： 为建立一种快速检测猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的SYBR Green实时荧光定量PCR方法,本试验首先进行了PEDV全序列多重比较,然后,基于保守区序列,设计了一对检测PEDV特异性引物,通过RT-PCR、克隆、提取、纯化、定量分析等步骤制备标准品.经优化反应条件建立标准曲线,用PCR和其它常规方法对其特异性、灵敏性、重复性进行比较评估,评估结果表明所建立的SYBR Green实时荧光定量PCR方法具有良好特异性,对PRRSV、CSFV、TGEV等常见肠道病原体没有交叉扩增反应;该方法敏感性高:可达102拷贝/μL.应用所建立的方法对江西省125份腹泻样品进行检测,PEDV检出率为92.8％,较常规RT-PCR检测方法76.8％的检出率高16％;该方法重复性好:对检测结果统计学分析表明批内、批间试验的变异系数分别为0.19％～0.53％和0.3％～2.1％.该试验所建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度更高,重复性好,且简单、快速,可用于PEDV早期感染猪群的诊断和定量分析及流行病学调查.

摘要： 为检测比格犬α-和β-干扰素(CaIFN-α和CaIFN-β),本研究根据GenBank中登录的IFN-α和IFN-β基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法.通过RT-PCR分别扩增IFN-α、IFN-β和GAPDH 的基因片段,并克隆于pMD19-T载体中制备标准品,建立的荧光定量RT-PCR标准曲线.结果表明:IFN-α和IFN-β和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×102拷贝/μL～1×108拷贝/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.994.熔解曲线显示为特异单峰,组内组间变异系数均少于3％,特异性和重复性较好.同时采用常规RT-PCR方法与本研究建立的方法对30份临床样品检测,结果显示IFN-α和IFN-β的阳性符合率分别是96.43％和96.55％.本研究建立的检测方法为比格犬IFN mRNA 的定量分析提供了有效手段.

摘要： 为检测比格犬α-和β-干扰素(CaIFN-α和CaIFN-β),本研究根据GenBank中登录的IFN-α和IFN-β基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法.通过RT-PCR分别扩增IFN-α、IFN-β和GAPDH 的基因片段,并克隆于pMD19-T载体中制备标准品,建立的荧光定量RT-PCR标准曲线.结果表明:IFN-α和IFN-β和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×102拷贝/μL～1×108拷贝/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.994.熔解曲线显示为特异单峰,组内组间变异系数均少于3％,特异性和重复性较好.同时采用常规RT-PCR方法与本研究建立的方法对30份临床样品检测,结果显示IFN-α和IFN-β的阳性符合率分别是96.43％和96.55％.本研究建立的检测方法为比格犬IFN mRNA 的定量分析提供了有效手段.

摘要： 为检测比格犬α-和β-干扰素(CaIFN-α和CaIFN-β),本研究根据GenBank中登录的IFN-α和IFN-β基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法.通过RT-PCR分别扩增IFN-α、IFN-β和GAPDH 的基因片段,并克隆于pMD19-T载体中制备标准品,建立的荧光定量RT-PCR标准曲线.结果表明:IFN-α和IFN-β和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×102拷贝/μL～1×108拷贝/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.994.熔解曲线显示为特异单峰,组内组间变异系数均少于3％,特异性和重复性较好.同时采用常规RT-PCR方法与本研究建立的方法对30份临床样品检测,结果显示IFN-α和IFN-β的阳性符合率分别是96.43％和96.55％.本研究建立的检测方法为比格犬IFN mRNA 的定量分析提供了有效手段.

摘要： 为检测比格犬α-和β-干扰素(CaIFN-α和CaIFN-β),本研究根据GenBank中登录的IFN-α和IFN-β基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法.通过RT-PCR分别扩增IFN-α、IFN-β和GAPDH 的基因片段,并克隆于pMD19-T载体中制备标准品,建立的荧光定量RT-PCR标准曲线.结果表明:IFN-α和IFN-β和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×102拷贝/μL～1×108拷贝/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.994.熔解曲线显示为特异单峰,组内组间变异系数均少于3％,特异性和重复性较好.同时采用常规RT-PCR方法与本研究建立的方法对30份临床样品检测,结果显示IFN-α和IFN-β的阳性符合率分别是96.43％和96.55％.本研究建立的检测方法为比格犬IFN mRNA 的定量分析提供了有效手段.

摘要： 为检测比格犬α-和β-干扰素(CaIFN-α和CaIFN-β),本研究根据GenBank中登录的IFN-α和IFN-β基因序列,分别设计合成特异性引物,以犬3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)mRNA为内参,建立SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法.通过RT-PCR分别扩增IFN-α、IFN-β和GAPDH 的基因片段,并克隆于pMD19-T载体中制备标准品,建立的荧光定量RT-PCR标准曲线.结果表明:IFN-α和IFN-β和GAPDH基因的Ct值与标准品稀释度在1×102拷贝/μL～1×108拷贝/μL内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.994.熔解曲线显示为特异单峰,组内组间变异系数均少于3％,特异性和重复性较好.同时采用常规RT-PCR方法与本研究建立的方法对30份临床样品检测,结果显示IFN-α和IFN-β的阳性符合率分别是96.43％和96.55％.本研究建立的检测方法为比格犬IFN mRNA 的定量分析提供了有效手段.

摘要： 本发明为一种一步法实时荧光定量RT‑PCR检测人细胞角蛋白7 试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人细胞角蛋白7(CK7) 的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者外周血、淋巴结等标本中CK7的表达，用以辅助诊断、指导治疗结直肠癌及提示预后。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人基质金属蛋白酶1的试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人基质金属蛋白酶1 (MMP1) 的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者结直肠癌手术切除标本中MMP1的表达，用以结直肠癌患者辅助诊断、指导治疗是否存在肝转移的指标。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人基质金属蛋白酶11的试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人基质金属蛋白酶11(MMP11)的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者结直肠癌手术切除标本中MMP11的表达，用以结直肠癌患者的辅助诊断、指导治疗及提示预后。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人miR‑1290试剂盒，该试剂盒以总mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人miR‑1290的表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者外周血标本中miR‑1290的表达，用以结直肠癌辅助诊断、指导治疗、复发及提示预后。

摘要： 本发明为一种实时荧光定量RT‑PCR检测人上皮细胞粘附分子试剂盒，该试剂盒以mRNA为模板，使反转录和实时荧光定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需打开管盖，避免了交叉污染，并可以精确定量检测标本中人上皮细胞粘附分子(Ep‑CAM) 的mRNA表达量。该试剂盒可以用于临床及科研中检测患者外周血标本中EP‑CAM的表达，用以结直肠癌辅助诊断、指导治疗及提示预后。

摘要： 本发明属生物技术领域，涉及定量RT-PCR检测试剂盒，具体是一种实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测的鸡高迁移率族蛋白B1的试剂盒。该试剂盒含有逆转录反应液、莫洛尼氏鼠白血病病毒逆转录酶、RNA酶抑制剂、聚合酶链反应液、耐热DNA聚合酶、标准品、对照品。本发明试剂盒通过逆转录(RT)mRNA样品得到cDNA，再结合实时荧光定量PCR检测技术，可以精确定量检测标本中鸡高迁移率族蛋白B1的mRNA表达量。该试剂盒可以用于鸡体内各组织脏器中HMGB1的表达分析，也可以用于检测不同状态下细胞中鸡HMGB1表达水平的变化。该发明为研究鸡HMGB1表达水平提供了一种快速、准确、可重复的检测方法。

摘要： 本发明提供的细菌实时荧光定量聚合酶链反应检测试剂盒，由PCR反应液1、标准品2、阳性对照品3、阴性对照品4、抽提裂解液5、操作说明书6、包装盒体7组成，盒体7设有容器孔，分别放置PCR反应液管1、标准品2、阳性对照品3、阴性对照品4、抽提裂解液5，PCR反应液管由单管分装，矩阵排列。本发明的试剂盒可在检测细菌DNA中应用。本发明方法运用实时荧光定量PCR技术实现了对常见菌通用检测的目的，有效地解决了以往PCR方法只能用于检测单一病原菌的问题，对常见的细菌感染进行通用检测，提高了细菌检测的通用性和敏感性，为细菌性感染疾病的早期病原体检测提供依据。

摘要： 本发明提供的细菌实时荧光定量聚合酶链反应检测试剂盒，由PCR反应液1、标准品2、阳性对照品3、阴性对照品4、抽提裂解液5、操作说明书6、包装盒体7组成，盒体7设有容器孔，分别放置PCR反应液管1、标准品2、阳性对照品3、阴性对照品4、抽提裂解液5，PCR反应液管由单管分装，矩阵排列。本发明的试剂盒可在检测细菌DNA中应用。本发明方法运用实时荧光定量PCR技术实现了对常见菌通用检测的目的，有效地解决了以往PCR方法只能用于检测单一病原菌的问题，对常见的细菌感染进行通用检测，提高了细菌检测的通用性和敏感性，为细菌性感染疾病的早期病原体检测提供依据。

摘要： 本实用新型公开了一种实时荧光定量聚合酶链反应仪，涉及荧光检测技术领域，能够提高内部器件之间的固定稳定性，进而提高仪器的检测准确性和使用寿命。包括一侧铰接的底座和盖板，在底座上设置有待测标本固定架，以及围绕待测标本固定架设置的弹性部件、温控部件和通风部件，盖板上设置有光学模组，光学模组的光学扫描通道朝向待测标本固定架。实时荧光定量聚合酶链反应仪还包括开关组件，开关组件包括相互配合卡合的第一开关部件和第二开关部件，第一开关部件设置在底座的一侧，第二开关部件设置在盖板的一侧。

摘要： 本实用新型提供的细菌实时荧光定量聚合酶链反应检测试剂盒由PCR反应液1、标准品2、阳性对照品3、阴性对照品4、抽提裂解液5、操作说明书6、包装盒体7组成。盒体7设有容器孔，分别放置PCR反应液管1、标准品2、阳性对照品3、阴性对照品4、抽提裂解液5，PCR反应液管由单管分装，矩阵排列。本实用新型提供的试剂盒设计合理，有效地解决了以往PCR方法只能用于检测单一病原菌的问题，对常见的细菌感染进行通用检测，提高了细菌检测的通用性和敏感性，提高了区分细菌性和非细菌性的能力。检测时间短快速，检测方法特异、敏感、准确。