流感嗜血杆菌核酸检测试剂盒国家参考品的建立

摘要

目的 建立流感嗜血杆菌(HI)核酸检测试剂盒国家参考品.方法 将10株流感嗜血杆菌和10株非流感嗜血杆菌参考菌株分别在各自适宜的培养基和温度下培养,收获新鲜的无菌培养物,计数并灭活后制备成10份阳性参考品、10份阴性参考品、1份最低检出限参考品和3份重复性参考品,使用两家试剂盒对参考品进行确证,考察参考品分装的均匀性以及在不同处理条件下的稳定性,并组织7家相关企业进行协作标定.结果 本参考品具有良好的准确性、特异性、重复性以及分装均匀性;反复冻融3、5次和分别于2～8°C、室温、37°C放置3、7、14天后均不影响参考品的稳定性;协作标定结果显示7家企业的试剂盒准确性、特异性和重复性均符合规定;最低检出限结果显示2家为102个/mL、3家为103个/mL、2家在104个/mL仍未检出.结论 建立了HI核酸检测试剂盒国家参考品,可用于相关试剂盒的质量评价.