通过溶瘤病毒靶向递送BiTE引发骨肉瘤局部抗肿瘤免疫的实验研究

摘要

目的:探索共表达双特异性T细胞接合器(bispecific T cell engager,BiTE)的VSVΔ51溶瘤病毒对骨肉瘤的抗肿瘤活性。方法:将BiTE的全长序列克隆到病毒糖蛋白和聚合酶基因之间产生VSVΔ51/BiTE溶瘤病毒;使用小鼠异源移植瘤模型评估VSVΔ51/BiTE的肿瘤抑制活性;通过免疫组化检测肿瘤组织的T细胞浸润情况;通过流式细胞术检测肿瘤浸润T细胞的激活状态。结果:成功构建VSVΔ51/BiTE溶瘤病毒,并通过Western blot验证其可以表达BiTE;体内抑瘤实验结果显示,VSVΔ51/BiTE较VSVΔ51的肿瘤抑制能力更强(P<0.0001);免疫组化结果表明,VSVΔ51/BiTE治疗后肿瘤浸润T细胞的数量较VSVΔ51治疗组显著增多(P<0.0001);流式检测结果表明,VSVΔ51/BiTE治疗可以有效增强肿瘤浸润T细胞的增殖能力(P<0.001),并提高了CD107a的表达水平以及干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的分泌水平(P<0.0001)。结论:溶瘤病毒VSVΔ51/BiTE可以显著抑制小鼠骨肉瘤的生长,同时激活肿瘤部位的抗肿瘤免疫反应,是一种非常有希望的骨肉瘤治疗策略。