磷酸酶基因PTEN对骨肉瘤细胞凋亡机制研究

摘要

目的 探讨肿瘤抑制基因PTEN对人骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡的影响及其分子作用机制.方法 将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP),转染MG-63细胞系,流式细胞仪分析转染效率及细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测PTEN mRNA水平变化,Western blot法检测PTEN蛋白表达,试剂盒检测caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性.结果 以感染复数为100,转染MG-63细胞2天后腺病毒感染效率即达93.2％±4.7％.转染PTEN基因5天后,细胞凋亡率为29.8％,细胞形态出现明显凋亡改变.分子学检测结果显示转染PTEN基因后,PTEN mR-NA及蛋白表达明显升高;caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性明显增加.结论 PTEN基因可能通过提高caspase-3、easpase-7、caspase-9活性,诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡.