DNA甲基化的焦磷酸测序通过率

摘要

目的研究不同的PCR产物投入量（2.5uL，5uL和10uL），对焦磷酸测序通过率的影响．方法从20例酒依赖患者和20例健康对照全血样本中提取DNA．按各样本的DNA用量200ng进行亚硫酸盐转化，经PCR扩增后，按PCR产物不同投入量（2.5uL，5.0uL和10.0uL），对目的基因序列进行焦磷酸测序．结果比较各组平均峰高值和焦磷酸测序通过率，5uL体系的平均峰高以及焦磷酸测序通过率均高于2.5uL体系；10.0滋L体系高于5uL体系，10uL体系为最佳．3组平均峰高和焦磷酸测序通过率，差异有统计学意义（＜0.05）．结论在DNA量统一为200ng进行亚硫酸盐转化的前提下，所得PCR产物投入量以10uL为最佳，焦磷酸测序通过率最高，达100%．